第1个回答 2018-10-09
核酸标记物有以下几类
1．核素标记物
放射性核素是目前应用最多的一类探针标记物.放射性核素的灵敏度极高,可以检测到10-14～10-18克的物质,在最适条件下可以测出样品中少于1000个分子的核酸含量.常用标记核酸探针的核素有32P、3H、35S,在Southern印迹杂交中以“P最常用.还应根据标记方法的不同选择相应标记方位的核素,一般情况下,大多数标记方法需要的是a—32P,而5,末端标记必须是r-32P.
2．非放射性标记物
多年来,科学家们致力于寻找一些安全、可靠、灵敏度高的物质代替放射性核素用于核酸分子杂交,并取得了一定的进展,部分非放射性标记物已在国内外逐步推广使用.其优点是无放射性污染,可以较长时间存放,从而更便于临床诊断等方面的应用.但此类非放射性标记物的缺点是灵敏度及特异性都不太高.根据其检测方法,非核素标记物可分为以下4类.
(1)半抗原：生物素(biotin)和地高辛(DIG)都是半抗原,可以利用这些半抗原的抗体进行免疫学检测,根据显色反应检测杂交信号.这两种物质是目前使用较普遍的非核素标记物.
(2)配体：生物素不仅是半抗原,故可用生物素与亲和素反应进行杂交信号的检测.
(3)荧光素：如FITC、罗丹明类等,可以发出紫荧光进行观察,主要适用于细胞原位杂交.
(4)化学发光探针：一些标记物可与某种物质反应产生化学发光现象,通过化学发光可以像核素一样直接使X线胶片上的乳胶颗粒感光.化学发光探针可能是今后非核素标记物研究的主要方向.