如何利用分子生物学技术，研究细菌基因组dna复制的起始因子

Question

如题所述

Answer 1

起始复合物的形成取决于几个起始因子的作用。在原核生物中，存在着三个起始因子（Initiation Factor 缩写为IF）IF－1，IF－2和IF－3。IF－1结合在30S核糖体亚基上，促进IF－2和IF－3发挥作用。IF－3的一个作用是通过结合在30S的小亚基上，使小亚基维持在游离的状态，IF－3与30S的结合可以防止30S和50S亚基形成排斥mRNA的不成熟的70S复合物。它对mRNA上的转录起始位置具有很高的亲和性。
结合了GTP的IF-2-GTP复合物可以特异识别起始tRNA，就是说，能够从细胞中的氨酰化的tRNA分子库中挑选出fMet- tRNAfMet。IF-2-GTP结合在30S亚基上，通过形成的30S复合物识别mRNA模板上的SD序列和起始密码，与mRNA相互作用，形成了一个由fMet- tRNAfMet、IF-2-GTP以及mRNA组成的前起始复合物。
一旦形成前起始复合物，50S亚基就与30S亚基结合，同时结合在IF－2上的GTP水解生成IF-2-GDP和Pi，然后结合在前起始复合体上的起始因子IF－1和IF－3解离，最后形成由30S与50S组成的起始复合物，fMet- tRNAfMet被定位在P位。IF-2-GDP 中的GDP与GTP交换重新生成IF-2-GTP。