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细菌感受态制备
EcoRI酶如何
制备
的?
答:
5. 转化BL21大肠杆菌
感受态
。别的感受态也行,据我所知BL21比较适合表达蛋白。6. 鉴定阳性克隆,并大量培养。搞个发酵罐就更好了。7. 收集菌体,破菌提蛋白。请自行百度“大肠杆菌蛋白提取”。8. 纯化EcoRI。这一步其实是最重要的,要是纯化的不好有杂蛋白,那就没法用。我这方面了解不多,所以...
平时实验没有做成功|我成功了做实验
答:
16.
制备
好了一批
感受态
,最好马上转化一种已知质粒,与此同时,取一点感受态接种到含抗性的固/液体培养基培养来做对照。这样第二天即可以知道这批感受态是否还有外源质粒,又可以知道这批感受态转化效率的高低。如果合格,那以后就可以放心使用! 17. 做克隆挑斑时,我们可以在将沾有菌体的牙签丢到试管前,在一块相应抗...
...好低啊。可否先把诱饵质粒转进去,做成
感受态
,再转文库?
答:
如果两种质粒同时转入
细菌
效率低的话,可以分两步转化:先转化一种质粒,然后把转化该质粒的细菌做成感受态,再转入另一种质粒,这样的效率会高很多。转化效率低的一个原因是,
制备感受态
时细菌超过生长对数期了,变老了,这样对转化效率有很大的影响,尤其是在做双杂交的实验。
切开的质粒能转化进入
感受态细菌
吗
答:
首先,切开的质粒是完全可能进入
感受态细菌
的,事实上所有的小分子态DNA,RNA都有可能进入任何细胞,但是你说能否转化又是另一回事了,如果你的质粒断在启动子了,那么就不能进行转化了,而且断的质粒很可能目的基因也断了,第三:断的质粒很不稳定,暴露的末端易遭受破坏。综上:也许切开的质粒确实能够...
感受态
细胞转化效率低的原因是什么
答:
实验证明,及贮存在4℃的培养菌液,因此重组dna大都构成环状双螺旋分子,最好分装保存于4℃ (3)细胞的生长状态和密度 最好从-70℃或-20℃甘油保存的菌种中直接转接用于
制备感受态
细胞的菌液。即应用对数期或对数生长前期的
细菌
,否则均会影响转化效率或杂dna的转入,od600为0.5时,如离心管 ...
感受态
因子在
细菌
转化中的作用?
答:
细胞自溶素:活力能受
细菌
细胞壁中的磷壁酸调节,正常生理条件下,其能适度水解细菌细胞壁,从而使得新的细胞壁得以不断插入。在这里因为它水解细菌细胞壁的能力,使得位于细胞表面的结合蛋白和核酸酶暴露出来。
感受态
因子:细菌生长到一定阶段后合成并分泌的一种小分子蛋白质,分子量在5000-10000,其能与...
感受态细菌
的名词解释!!!
答:
经过适当处理后容易接受外来DNA进入的
细菌
。如大肠杆菌经CaCl2处理,就成为容易受质粒DNA转化的细胞。
如何设计含attb位点的pcr引物
答:
用CaCl2法
制备感受态
细胞的原理是通过低渗的CaCl2溶液在低温 时处理快速生长的
细菌
从而得到感受态菌株细菌外形膨胀为球形 这样的形态结构有利于外源DNA分子形成抗DNA酶的羟基 钙磷酸复合物 这种复合物会粘附在细菌表面 如果热激 细胞对DNA的吸收将大大加强。 实验的关键是选取出于对数生长期的菌株 所有的操作必须尽可能...
给抗生素“把把脉”阅读题答案
答:
参考答案:1、(3分)C 2、(3分)唤醒细菌的耐药基因,增强细菌的修复功能,诱导
细菌感受态
的产生(每点1分,意同即可)。3、(2分)造成滥用抗生素的原因有很多。4、(4分)流行性感冒属于病毒感染,不可使用抗生素,而她服用的阿莫西林、头孢氨苄胶囊都是抗生素。同时服用几种抗生素药物也不行。
dh10b是
感受态
细胞还是
细菌
答:
用Ca2+处理细胞(例如应用最广泛的大肠杆菌),使细胞处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,这种细胞称为
感受态
细胞.
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