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冻存细胞用冻存液还是血清好
求救,培养基
和血清
哪个对
细胞
贴壁的影响比较大
答:
细胞
可能不能正常贴壁或贴壁不牢,因为
血清
中有促进细胞贴附的蛋白。对细胞的生长状态也会有影响,因为血清中有很多促进细胞生长的营养物质,由于我不是很专业,你可以去上海恒远生物科技有限公司询问下,那里有专业的技术人员会帮你解答的
细胞
培养的具体步骤和要求以及注意事项
答:
三、细胞
冻存 细胞
密度达到80%~90%时,去培养基,10mlPBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放人细胞培养箱3min。加入lmlDMEM完全培养基终止胰酶消化,转移至15ml离心管。加入10mlPBS清洗细胞培养盘,转移至15ml离心管,2000rpmX2min,弃上清液。加入lml
冻存液
(90%
血清
,10%DMSO),放入冻存...
细胞冻存
融化怎样操作?为什么?
答:
细胞冻存
融化的原则是缓冻速融 细胞冻存(慢)1.预先配制
冻存液
:10 % DMSO + 90%胎牛
血清
,4℃冰箱保存预冷;2.用胰酶对细胞进行消化:倒去培养瓶中的培养基或用枪小心吸去培养板中的培养基,PBS冲洗两次,用胰酶消化细胞(尽可能温和);3.将预冷的冻存液悬浮细胞,用滴管轻轻吹打混匀.4.在...
细胞
学堂 | 如何将H9c2(2-1)养得更好?
答:
本期为大家总结了, 在培养H9c2(2-1)细胞过程中,特别需要注意的地方。溶解细胞过程要迅速 ;已溶解的
冻存细胞
不能在常温下存放太久,需要尽快离心去除DMSO。推荐配比: 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO的
冻存液
;细胞冻存时, 尽量吹散细胞,注意控制吹打力度 。H9c2(2-1)细胞为贴壁细胞,正常...
细胞冻存
答:
取处于对数生长期的
细胞
,用胰酶消化成单个细胞,浓度约为2×10 6(6是上标)个/ml,
冻存液
配方:20%牛
血清
,10%二甲基亚砜(用进口的)的1640培养液。置2ml冻存管中,-20℃,2h;-40℃,2h;-80℃,2h,然后放入液氮中即可。
细胞冷冻保存
的关键要注意的问题是什么?
答:
3. 离心1000rpm,5min;4. 去除胰蛋白酶及旧的培养液,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使
细胞
均匀,计数,调节
冻存液
中细胞的最终密度为5×106/ml~1×107/ml;5. 将细胞分装入冻存管中,每管1~1.5 ml;6. 在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;7. 冻存:标准的...
细胞
复苏不好怎么办
血清
浓度
答:
细胞冻存
时候需要细胞状态在对数生长期,
冻存液
的配比是 DMSO:
血清
:培养基=1:2:7, 但一般偷懒的方法就是直接用带血清的培养基与DMSO成9:1的配方配制。冻存时需要程序降温,如果有条件使用程序降温盒比较好,可以达到1度每分钟。有的细胞不适合
冻存使用
,一冻存就失去性质或者活性,比如原代细胞...
细胞
培养的几种方法和步骤
答:
传代后的潜伏期会缩短。冷冻保存与复苏原代细胞培养过程中,细胞需在体外模拟生理环境。操作涉及选对数期细胞,制备悬液,加入
冻存液
,分装后按特定速率冻存。复苏时,需迅速融化并离心洗涤,以确保细胞活力。
冻存细胞
复苏技术
是细胞保存
的关键,复苏后的细胞需适当稀释,以维持适宜的数量,确保长期使用。
细胞冻存
的步骤
答:
细胞冻存
的步骤如下:1. 配制含 10%DMSO、20%小牛
血清
的冻存培养液 4mL。2. 取出生长良好的细胞。3. 吸除旧的培养液:拿出吸管(要拿吸管的上端),插入与抽滤瓶相连的橡胶管 中,在酒精灯外焰灼烧灭菌,细胞培养瓶倾斜将吸管插入瓶底部一角,吸出旧的培 养液,将用后的吸管弃于废弃缸里。4...
怎样保证
冻存液
中的DMSO无菌
答:
保证
冻存液
中的DMSO无菌:是纯的DMSO,通常在整个冻存液中的比例为10%,通常冻存液的配置方法是20%
血清
,10%DMSO,70%培养液,一般用90%血清+10%DMSO,这个方法复苏后细胞的存活率非常高。
细胞冻存是细胞
培养、引种、保种和保证实验顺利进行的重要技术手段。在细胞建株和建系中,及时冻存原始细胞...
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