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pcr切胶回收的步骤
通过16srDNA鉴定细菌的疑惑
答:
2.PCR产物跑胶的目的是找到目的条带,因为在你
PCR的
过程中也许会产生一些非特异性的扩增,这些是不能拿去做转化的。所以跑玩PCR后要跑胶,找到目的片段再进行
切胶回收
。溶液回收是不行的。3.基本流程就是这样的。DNA提取完了以后还是要跑胶检测的,测定DNA提取的效果和浓度。胶回收一定是找到目的片段...
急求!!DNA测序的问题
答:
琼脂糖凝胶电泳在测序中有那些应用(我只知道在定模板量和对
PCR
原液进行
切胶回收的
时候需要进行电泳检测。不过这最后一个问题不着急主要是前边的那些)?备注:最好能用一些通俗易懂的话帮我解释下,还有就是不要从网上给我复制一堆东西过来!!如果是从网上复制的那还是麻烦您不要粘了!!那些东西我会找就不用麻烦您...
求分子克隆具体实验
步骤
一份~~多谢各位大侠啦~
答:
注:琼脂糖凝胶电泳检测如果有杂带侧需要割
胶回收
目的片段。3.PCR产物纯化:根据PCR产物回收试剂盒上流程
回收PCR
产物,最后用45ddH2O洗脱-20℃保存或下一步实验.4.PCR产物酶切(50ul)PCR纯化产物 43ul 10xBuffer Tango 5ul E1 1ul E2 ...
切胶回收
回来的是质粒吗
答:
不是。
切胶回收
回来的样品一般包括
PCR
产物和各种酶切产物并不是质粒,但还要经过加工处理产生化学反应后才能形成连接进行的质粒构建。
pcr
产物第一次跑胶,有明显的一个条带。
切胶回收
后,将回收产物再次跑胶...
答:
应该是两条挨得很近的条带。可能是
pcr回收
产物有杂带污染,跑pcr产物的时候没有分开,然后回收纯化以后,再跑就分开了。这个酶切之后跑电泳也是两条带。双酶
切的
话,没关系的,照样回收照样连,照样出结果。
酶切技术的技术问题
答:
应用大体系,如100微升。纯化问题:纯化
PCR
产物割胶还是柱式,优选柱式,因为割胶手法不准,很容易割下大块的胶,影响纯化效率。现在的柱式纯化号称可以祛除引物,既然如此,酶切掉的几个碱基肯定也会被纯化掉了。所以,PCR产物和双酶切产物的纯化均可应用柱式纯化。优选TAKARA的纯化柱试剂盒。酶量的问题:...
胶回收
试剂盒对rna是否具有回收作用
答:
该试剂盒通过将含有DNA或RNA的凝胶放入离心管中,加入抽提液浸泡后进行离心操作,吸取上清液并使用特殊试剂沉淀DNA或RNA。这种方法操作简单且高效,能够实现较高的
回收
率,不会引入其他试剂污染。得到通过该方法从PAGE凝胶中回收到的DNA或RNA具有更高纯度,可以直接应用于酶切、转化、测序以及
PCR
等分子生物学...
PCR
产物电泳做
胶回收
不也得到纯化的目的?PCR产物纯化试剂盒的好处是什么...
答:
PCR
产物纯化试剂盒去除的是PCR反应体系中的离子、dNTP、引物以及聚合酶,收集其中的DNA片段。这只适合于几乎没有非特异性条带的PCR产物的收集。如果你的PCR产物具有非特异性条带,那么一定需要使用
胶回收
试剂盒。
用Taq酶扩增的带有A尾的DNA,做
胶回收
后还有A尾吗?
答:
回收
后A尾还在,不会丢失。
PCR
产物可直接用于连接,不过需要以下条件:1、产物要纯,没有杂带。否则要
切胶
纯化。2、产物量合适,有明显条带一般加入2ul就够了,除非你的产物很长。一般不影响连接效率。
请问
PCR
后的酶切跑
胶的
原理和目的,谢谢。
答:
回收
纯化得到目的条带,以用于下游的实验。
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