99问答网
所有问题
当前搜索:
pcr切胶回收的步骤
PCR
产物是用
胶回收
试剂盒还是直接PCR产物纯化试剂盒
答:
胶回收
试剂盒操作
步骤
:配制琼脂糖EB凝胶,电泳以分离DNA片段。任何类型或等级的琼脂糖都可以使用。电泳足够时间后,在紫外灯下小心地把所需的DNA的片段切下来。并尽量去除多余的凝胶。称取空离心管的重量,切下带目的片段的凝胶装在1.5ml离心管中并称其重量,求出凝胶块的重量,近似地确定其体积。一般...
有谁知道
PCR
扩增中 什么是割
胶回收
? 该怎么操作?
答:
将PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳
,
将目的产物的条带用刀片切下来,用一定的溶剂把胶溶解,然后回收溶液中的DNA片断,这个就是胶回收
。至于具体的操作步骤和溶液,都有现成的试剂盒卖的。很多生物技术公司都做。比如,比较好的有TAKARA的。试剂都是配好的,有详细的操作步骤,按照那个来就可以了。只要有离心...
植物基因工程实验技术-
胶回收
答:
(3)有些酶切产物酶切后仍为单一的 DNA片段,不需要进行跑
胶回收
,如目的基因
PCR
产物酶切后,往往只切除掉了几个保护碱基。这种情况下,直接向酶切产物中加入3倍体积的溶胶液GSB,按照后续
步骤回收
即可。若酶切体系小于100ul,建议先用ddH,O将体系补足至100ul。1.提前准备 查看是否有人在用电泳仪,TAE是否够,打开金...
PCR
扩增目的基因以后,怎么用琼脂糖电泳
回收
及纯化呢?希望高手指教!_百度...
答:
DNA的回收使用AXYGEN公司AxyPrep DNA凝
胶回收
试剂盒,
回收步骤
如下:1、 在紫外灯下切下含有目的DNA的琼脂糖凝胶,用纸巾吸尽凝胶表面液体并切碎。计算凝胶重量(提前记录1.5 ml离心管重量),该重量作为一个凝胶体积(如100 mg=100 μl体积);2、 加入3个凝胶体积的Buffer DE-A,混合均匀后于75 ...
请问
PCR
后的酶切跑
胶的
原理和目的,谢谢。
答:
回收
纯化得到目的条带,以用于下游的实验。
用于与载体连接的
pcr
酶切产物是如何纯化的 、、
答:
跑胶后找到目的片段,
切胶回收
,纯化的传统法就是将
PCR
产物加入2倍体积的乙醇-20度沉淀过夜后低速短暂离心(如 3000rpm离心1~2min),弃掉上清,然后用70%乙醇洗涤一次后,弃掉乙醇,放干后再用无菌水或者TE溶解.当然这种方法对PCR产物纯化后回收率是很低的,你需要多做几管PCR,然后一起纯化回收.但是现在...
DNA
回收
纯化
步骤
?
答:
也用的试剂盒。先把DNA在一般的胶里电泳,然后按照Maker挑选出需要的条带,在紫外下把条带所在的那一小块
胶切
下来,然后用
胶回收
试剂盒里的溶液把胶在水浴里溶解掉,然后过试剂盒里的柱子得到纯净的DNA。详细的过程试剂盒里都有写,基本跟楼上说的差不多。最后做DNA的连接和转化,最后挑克隆提质粒...
为什么
pcr
有条带但是
胶回收
得不到?
答:
buffer太少。
胶回收的
时候,用的是1%的琼脂糖凝胶电泳,0.2g琼脂糖,20mlTBE,用一厘米左右的梳子,上样的时候,上样量20微升,配1微升loadingbuffer可得到胶回收。DNA片段通过
pcr
扩增后,进行跑胶、
切胶回收
。跑胶染色后有很亮的条带,但是胶回收后什么也没有。
若
pcr
产物电泳后不能及时
回收
,
胶
应怎样处理
答:
把目的条带的位置的
胶
挖下来,放在一个离心管里,置于4度冰箱,可过夜,第二天再来
回收
我想问一下从
PCR
开始有带
胶回收
双酶切,载体双酶切,胶回收后怎么把载体和...
答:
我们用天根公司的
胶回收
试剂盒,回收目的基因及载体双酶切后的产物用于连接,连接体系如下:一般载体1微升,目的基因8微升左右(没.测OD),用T4DNA连接酶(购于TaKaRa公司)1微升,再加酶缓冲液(2.5微升)和水至总体积25微升,16度过夜后第二天转化感受态细菌。目的基因与载体的摩尔数比一般为3至10...
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
涓嬩竴椤
灏鹃〉
其他人还搜
pcr条带浅怎么胶回收
PCR产物的回收与纯化
切胶回收原理和步骤
pcr产物切胶回收
pcr产物回收与胶回收区别
pcr胶回收的目的
pcr胶回收图片
DNA割胶能隔夜保存嘛
pcr产物直接胶回收