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mtt法在药物开发中的应用
什么是“四甲基偶氮唑盐比色法(
MTT法
)”?
答:
目前MTT法常用于以下几个方面的研究:
1、检测细胞活性:常作为细胞毒性试验的一种方法
。2、体外药物敏感实验:该方法简便、经济、快速,重复性好,所需的细胞数较少,目前广泛的用于临床前的抗癌药物的筛选研究。3、一些细胞因子活性的研究。
MTT
原理是什么,用途是什么?
答:
MTT主要有两个用途
1.药物(也包括其他处理方式如放射线照射)对体外培养的细胞毒性的测定;2.细胞增殖及细胞活性测定
。检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲臜,用酶标仪在...
MTT法
MTT 溶液的配制方法
答:
MTT 法是一种常用的实验技术,其关键步骤之一是MTT溶液的配制
。首先,需要准备的MTT浓度为5毫克每毫升。具体操作是,取0.5克MTT粉末,将其溶解于100毫升的磷酸缓冲液(通常选择PBS)或者无酚红的培养基中。在溶解过程中,确保容器的清洁,以保证溶液质量。完成溶解后,使用0.22微米的滤膜过滤,以去除溶...
mtt实验
原理
答:
药物MTT法
实验步骤:贴壁细胞:1. 收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度1000- 10000 /孔,每次加入细胞的枪头贴着96孔的四周,旋转缓慢加入,加入细胞后可前后左右水平摇晃几下,以让细胞铺板更佳。2. 5%CO2,37℃孵育,至细胞单层铺满孔底(96孔平底板),加入...
MTT实验
——原理、步骤、注意事项、示例图
答:
MTT实验:深入解析与关键步骤
MTT实验在生物学领域有着广泛的应用
,
涵盖细胞增殖、毒性、活性评估、药物筛选以及肿瘤放射敏感性测试等多个方面
。以下将详细探讨实验原理、所需设备和试剂、步骤详解以及重要注意事项。实验应用细胞增殖测定:MTT通过测量活细胞中的Formazan形成来反映细胞数量。细胞毒性测定:MTT结晶...
mtt法
原理和步骤是什么?
答:
MTT法
,即甲基四唑溴化物法,常用于细胞毒性实验和增殖检测。其原理在于活细胞中的线粒体脱氢酶能将黄色的MTT还原成蓝紫色的甲瓒,沉积在细胞中。通过检测甲瓒的量,可以反映细胞的活性。活细胞越多,代谢越旺盛,还原出来的甲瓒就越多。相反,如果细胞受到毒性损伤,细胞的活性下降,导致代谢减少,形成的...
mtr是什么的检查方法(医学方面)
答:
四甲基偶氮唑盐比色法(
MTT
方法),是通过快速简便的颜色反应来检测细胞存活数量。其原理是MTT可作为哺乳类动物细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶的底物。当有活细胞存在时,线粒体内琥珀酸脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成蓝紫色的针状甲月替 (Formazan)结晶并沉积在细胞中,结晶物能被二甲基亚砜 (DMSO)溶解,用...
mtr是什么的检查方法(医学方面)
答:
四甲基偶氮唑盐比色法(
MTT
方法),是通过快速简便的颜色反应来检测细胞存活数量。其原理是MTT可作为哺乳类动物细胞线粒体中琥珀酸脱氢酶的底物。当有活细胞存在时,线粒体内琥珀酸脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成蓝紫色的针状甲月替 (Formazan)结晶并沉积在细胞中,结晶物能被二甲基亚砜 (DMSO)溶解,用...
mtt实验
方法
答:
MTT法的
局限:只能测定细胞相对数和活力,不能测绝对数,操作需无菌,避免细菌干扰。实验设置:包括调零孔、对照孔和加药孔,确保所有条件一致。避免血清干扰:尽量使用低血清浓度的培养液,以保持试验敏感性。接下来是实验步骤的精确执行:MTT溶液的配制通常使用5mg/ml的MTT,称取0.5g溶于100ml PBS中,...
请问做
mtt法
时,怎么对
药物
进行梯度稀释?
答:
一般是两倍梯度稀释,第一孔加200ul含有
药物的
培养液,第二孔加100ul培养液,第三孔加100ul培养液。。。从第一孔取100ul加到第二孔混匀,从第二孔取100ul加到第三孔混匀,第三孔取100ul扔掉。。。能明白吗?如果不明白欢迎继续追问
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