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DNA电泳拖尾现象产生的原因
在挖琼脂糖凝胶块时为什么尽量减少不含目的
DNA的
凝胶?为什么尽量用长波 ...
答:
电泳出现拖尾现象
,英文成为smear,就是弥散。其
原因
,主要从以下两个方面考虑: 1、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。对策:①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。③适当...
DNA
提取时,最后一步多加了TE 100ul ,对
电泳
结果有影响吗?
答:
这个很好解释啊,你每次都是提取好
DNA
第一次跑
电泳
结果跟预期一致,后面跑就不一致了这是因为提取得到的DNA由于含有DNA酶会降解断裂,反复冻融DNA样品的话就会更厉害,DNA降解了就会
形成
弥散状的条带,也就
拖尾
了,特别是提取的DNA纯度不高的时候,降解就会更严重. 给你一个建议,DNA提取好之后,将得到的DNA...
提取植物基因组
DNA
后紫外分光光度计检测值标准,为什么
电泳
图很不好?
答:
用的是那种提取方法??有没有加RNase分解RNA??我记得中间有几步很关键,再重复一遍,注意一下细节。
拖尾
说明基因片段很多,可能在离心环节或是缓冲液有问题。
DNA电泳
条带都代表什么啊?
答:
1. DNA电泳条带在紫外灯下才能清晰可见。2.
DNA电泳的
原理基于不同长度的DNA片段在相同的电场力作用下,在琼脂糖凝胶中迁移的距离不同。通常,片段长度越短,迁移距离越快,因此较小的片段会在凝胶的下部
出现
。3. 进行DNA电泳时,通常会在凝胶上加入DNA分子量标记(marker),它由已知大小的多个DNA...
为什么提取的RNA
电泳
后又
拖尾现象
?
答:
有
DNA
污染,或者是
出现
降解
rna条带
拖尾的原因
答:
1、非特异性扩增过多:PCR产物
出现拖尾的
一个常见
原因
是非特异性扩增过多。2、样品降解或存在RNA:样品在
电泳
前
发生
了降解或存在RNA,也导致条带
拖尾的出现
。3、引物二聚体:引物二聚体的存在也是导致RNA条带拖尾的一个原因。
提质粒能开酒精灯么
答:
还有可能是你的琼脂糖凝胶浓度太高了,浓度越高,分子筛
效应
越大,质粒又比较大,当然容易
拖尾
了.其次也可能是你的
电泳
电压过大;还有就是RNA污染,你提完质粒后没有用RNase降解,不过这就不叫拖尾了,称作有杂带.至于注意事项,你搞清每一步的原理后自己仔细想想就知道了.时刻记住不要让质粒因为机械损伤而...
电泳的
结果检测
答:
这种情况在用较厚的凝胶以及垂直
电泳
中时常
发生
。向下的“皱眉”
现象
常常是由于垂直电泳时电泳槽的装置不合适引起的,特别是当凝胶和玻璃板组成的“三明治”底部有气泡或靠近隔片的凝胶聚合不完全便会
产生
这种现象。2.“
拖尾
”现象是电泳中最常见的现象。这常常是由于样品溶解不佳引起的,克服的办法是在加...
琼脂糖凝胶
电泳
注意事项
答:
四、样品加入量:一般情况下,0.5cm宽的梳子可加0.5μg的
DNA
量,加样量的多少依据加样孔的大小及DNA中片段的数量和大小而定,过多的量会造成加样孔超载,从而导致
拖尾
和弥散,对于较大的DNA此
现象
更明显。五、
电泳
系统的变化会影响DNA迁移,加入DNA标准参照物进行判定是必要的。六、DNA样品中盐浓度...
10倍的TAE,2.0%琼脂糖凝胶
电泳
适合分离多大的
DNA
答:
为什么用10倍的TAE呢?过大的离子强度,泳动速度过快,会造成极强的
拖尾
吧。1倍百分之二的,分到几十个b是没问题的。正常P出来的东西都能分出来。
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