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重组子筛选的主要方法
建立基因文库的目的
答:
对cDNA 文库质量的评价
主要
有两个方面。第一方面为文库的代表性,cDNA 文库的代表性是指文库中包含的重组 cDNA 分子反映来源细胞中表达信息(即 mRNA 种类)的完整性,它是体现文库质量的最重要指标。文库的代表性好坏可用文库的库容量来衡量,它是指构建的原始 cDNA 文库中所包含的独立的
重组子
克隆数。库容量取决于...
人工染色体的常用载体
答:
1.YAC人工染色体载体的复制元件和标记基因在 YAC 载体中最常用的是 pYAC4 。由于酵母的染色体是线状的,因此其在工作状态也是线状的。但是,为了方便制备YAC载体, YAC 载体以环状的
方式
存在,并增加了普通大肠杆菌质粒载体的复制元件和选择标记,以便保存和增殖。YAC 载体的复制元件是其核心组成成分,...
比较分析基因组DNA文库和cDNA文库。
答:
【答案】:基因组DNA文库和cDNA文库
的主要
区别如下:(1)构建过程不同 ①基因组DNA文库 a.用限制性内切酶切割细胞的整个基因组DNA,制备大小合适的随机DNA片段。b.将这些DNA片段与与适当的载体连接成
重组子
。c.将重组子转化到细菌中,让宿主菌长成克隆,整个克隆群体包含基因组的全部基因片段总和,即成为...
二十一世纪基因技术的几个重大突破
答:
作为微生物资源研究和开发领域里的一个重大探索,可以采用最新的分子生物学
方法
,绕过菌种分离纯化这一步骤,直接在自然界中寻找有开发价值的微生物基因。把来源于未经培养的微生物的DNA克隆到业经培养驯化的宿主生物体中,然后用高通量
筛选
技术从
重组的
克隆里筛选为新酶编码的基因。 微生物世界展示给人类如此巨大的机会使...
微生物基因建库怎么做
答:
判断一个 cDNA 文库中的 cDNA 序列是否是全长基因的 cDNA,
主要方法
有以下几种。 1.2.1 直接从序列上评价 5'端:如果有同源全长基因的比较,可以通过与其它生物已知的对应基因5'末端进行比较来判断。如果无同源基因的新基因,则首先判断编码框架是否完整,即在开放阅读框的第1个 ATG 上游有无同框架的终止密码子;...
载体构建的原理及
方法
答:
质粒由多个功能区域组成,包括起始子、选择性标记基因、多克隆位点等,区域可以用于插入和操作外源DNA。2、载体构建的方法:将外源DNA片段与线性化的质粒进行连接,形成
重组
质粒。使用适当的转化方法将构建好的质粒转化到目标细胞中,使其能够进入细胞内。通过适当的
筛选方法
,如选择性培养基或标记基因的表达...
基因工程
答:
用于cDNA克隆的载体有两类:质粒DNA和噬菌体.又将其分为表达型载体和非表达型载体.选用表达型载体可以增加目的基因的
筛选方法
,有利于目的基因的筛选.cDNA片段与载体的连接通常采用下面方法:加同聚尾连接:在载体和cDNA的3'末端加上互补的同型多聚酶序列.人工接头连接:所谓人工接头是指用人工合成的,连接...
谁做过酶切质粒的实验啊,制感受态细胞然后转化呢?求详细过程及注意要点...
答:
其原理是细菌处于0℃,CaCl2的低渗溶液中,菌细胞膨胀成球形,转化混合物中的DNA形成抗DNase的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面,经42℃短时间热冲击处理,促使细胞吸收DNA复合物,在丰富培养基上生长数小时后,球状细胞复原并分裂增值,被转化的细菌中,
重组子
中基因得到表达,在选择性培养基平板上,可选出所需的转化子。
生物制药工艺学萃取分离有哪些
方法
答:
选择育种
方法
时需综合考虑的因素(1)待改良性状的本质及与发酵工艺的关系(例如分批或者连续发酵试验);(2)对这一特定菌种的遗传和生物化学方面认识的明了程度;(3)经济费用。如果对特定菌种的基本性状及其工艺知晓甚少,则多半采用随机诱变、
筛选
及选育等技术;如果对其遗传及生物化学方面的性状已有较深的认识,则可选择...
微生物与自然界中物质循环的转换关系
答:
3、重组体检出(四)原生质体融合 Protoplast Fusion通过人为
方法
,使遗传性状不同的两细胞的原生质体发生融合,并产生
重组子的
过程,又称细胞融合。一、特点1、杂交频率高2、受接合型或致育性限制较少,但与亲缘性有一定关系。3、遗传物质传递更完整。4、存在两株以上亲株同时参与融合可能。5、可以采用产量性状较高...
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