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重组子的筛选常用方法
3种基因文库的构建中对
重组子的筛选方法
并简述其原理
答:
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抗性筛选
。利用培养基中的药物进行筛选。重组子可获得抗性。2
影印筛选
。利用核酸探针对具有目的DNA片段的宿主进行筛选。3
营养缺陷筛选
。宿主是营养缺陷型,重组子可使宿主获得营养补偿能力,从而起到筛选效果。
系统分析你掌握的几种
重组
阳性克隆
子的筛选
和鉴定
方法
答:
【答案】:(1)根据重组子遗传重组表型改变的筛选法
1)利用抗生素抗性基因进行筛选 2)通过α互补使菌产生颜色来筛选 3)利用报告基因筛选克隆子
(2)根据重组子结构特征的筛选法
1)琼脂糖凝胶电泳比较重组DNA的大小
2)限制性内切酶分析 3)印迹杂交方法 4)PCR法 (3)
根据目的基因表达产物采用免疫化学方法
...
影响感受态细胞转化效率的因素有哪
重组子筛选
的主要
方法
有哪些?
答:
2.重组子筛选一般方法是标记基因.即在基因片段上插入一段抗生素基因
,然后在含有病菌和核苷酸的培养皿上培养,存活下来的即使符合条件的重组子.3.还有
染色法和人工筛选法
重组子的重组子 -
重组子的筛选
答:
根据质粒基因型和受体菌基因型互补原则而定; 重组子的筛选方法常用的有两种方法: 1、
抗生素筛选法:菌株为某种抗生缺陷型
, 而质粒上带有该抗性基因(如氨苄青霉素, 卡拉霉素等)这样只有转化子才能在含该抗生素的培养基上长出。本
怎样用营养缺陷型
筛选重组子
与非重组子
答:
该筛选方法如下:
1、突变型受体细胞上缺乏合成某种必需营养物质
,而载体分子上携带了这种营养物质的生物合成基因,利用缺少该营养物质的合成培养基进行涂布培养时,阳性转化子能够长出菌落。2、已经诱变产生的合成Lys的缺陷型菌株为受体细胞,当载体分子上含有Lys合成基因时,转化后利用不含Lys(即Lys-)的...
基因工程中
筛选
鉴定
重组子的方法
答:
你有目的基因植入的话 例如你已知导入的目的基因有BT毒蛋白,你就让蚜虫去吃,这是个体检测,用DNA分子探针或分子杂交法是分子水平。看是否成功表达是蛋白质水平。你导入某个目的基因的话,利用该基因的特性去区别。你导入抗四环素基因,放在含四环素的培养基中去,活下来的就是你要的。给满分哈哈哈 ...
怎样用营养缺陷型
筛选重组子
和非重组子
答:
转化、
筛选
、鉴定。1、将外源DNA片段与载体DNA的连接反应物不经分离直接用于转化,再加上
重组
率和转化率的不理想,因此必须通过筛选和鉴定来区分转化子与非转化子。2、在不含目标营养组分的培养基上,只有转化子才能生长。因此,通过观察菌落在特定培养基上的生长情况,就可以初步判断哪些是转化子。3、...
电泳法
筛选重组子的
原理
答:
电泳法
筛选重组子的
原理是利用电泳技术将基因重组片段从其他DNA片段中分离出来。根据查询相关公开信息显示,电泳过程中,每个DNA片段在电压作用下在电泳胶中移动,并根据其尺寸大小,分别向正电压方向或负电压方向移动,从而实现对DNA片段的精确分离。
dna
重组子的筛选
鉴定有哪些步骤
答:
DNA
重组
技术步骤如下:一、质粒DNA 提取的pQE-31和pUC18-CAT 质粒。二、制备重组DNA 在灭菌的1.5mL 离心管中,加入pQE-31质粒10mL(2mg/mL),2mL酶切缓冲液,1mL BamHI 和HindIII酶 的混合液(各含10个单位),无菌双蒸水7mL,至反应混合物总体积为20mL,离心混匀,37℃反应过夜。2. 在另一...
如何
筛选
真正获得目的基因并能有效表达的
重组子
答:
标记基因
和目的基因是连在一起的。用标记基因筛选基因载体的方法很简单,在表达载体上一般有两个甚至两个以上的标记基因,比如,一个是抗青霉素的基因,一个是抗四环素的基因,将目的基因插入到抗四环素的基因中,那这个表达载体就不能表达出抗。筛选原则是:在什么受体细胞中表达,就用什么受体受体细胞内...
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