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蛋白质含量测定双缩脲法
双缩脲法测定蛋白质含量
答:
方法
:1.标准曲线的
测定
:取12支试管分两组,分别加入0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升的标准
蛋白质
溶液,用水补足到1毫升,然后加入4毫升
双缩脲
试剂。充分摇匀后,在室温(20~25℃)下放置30分钟,于540nm处进行比色测定。用未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照液。取两组测定的平均值...
双缩脲法测定蛋白质
答:
双缩脲法测定蛋白质如下:
双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液,呈蓝色,由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制
。当底物中含有肽键时(多肽),试液中的铜与多肽配位,配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。鉴定反应蛋白质单位1...
双缩脲法测定蛋白质含量
答:
双缩脲法
最常用于需要快速但并不需要十分精确的
测定
。二、试剂和器材 试剂:(1)标准
蛋白
溶液(5mg/ml):准确称取已定氮的酪蛋白(干酪素或牛血清白蛋白)用0.05mol/L氢氧化钠溶液配制,冰箱存放备用。(2)双缩脲试剂:溶解1.5g硫酸铜(CuSO 4 ·5H 2 O)和6.0g酒石酸钾...
简述几种
蛋白质含量
的
测定方法
及原理。
答:
(2)双缩脲法:蛋白质含有多个肽键,因此有双缩脲反应,即Cu2+与蛋白质的肽键络合,形成紫红色络合物
,此物在540nm处有最大的光吸收,可以比色测定,其颜色的深浅与蛋白质浓度成正比。测定范围为0.5~10mg/ml。(3)福林-酚试剂:第一步是双缩脲反应,反应生成的络合物以及酪氨酸、色氨酸残基还原磷...
蛋白质含量
的
测定方法
有哪些
答:
蛋白质含量测定的方法有微量凯氏定氮法、双缩脲法、folin―酚试剂法、考马斯亮兰法、紫外吸收法等
。1、微量凯氏定氮法:含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸铵。经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。2、双缩...
蛋白质含量测定方法
有哪些?
答:
蛋白质含量测定
方法如下:一、蛋白质含量测定 1.
双缩脲法
双缩脲是有两分子尿素缩合而成的化合物。将尿素加热到180℃,则两分子尿素缩合,放出一分子氨。双缩脲在碱性溶液中能与硫酸铜反应生成红紫色络合物,称为双缩脲反应。蛋白质中的肽键与之类似,凡是具两个以上肽键的物质均会也能起双缩脲...
如何利用
双缩脲
试剂来鉴别
蛋白质
的存在?
答:
具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与
双缩脲
试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的络合物。颜色深浅与
蛋白质浓度
成正比。在蛋白质的鉴定实验中,最好选用富含蛋白质的生物组织,植物材料常用的是大豆,动物材料常用的是稀释的鸡蛋清。双缩脲试剂是一个用于鉴定蛋白质的分析...
测定蛋白质含量
有哪些
方法
答:
2.
双缩脲法
双缩脲法是一种基于蛋白质与特定试剂反应呈现特定颜色的原理来
测定
蛋白质的方法。该方法的优点在于操作简便,反应快速且呈现的颜色与
蛋白质含量
呈正比关系,适合在实验室及临床中进行常规检测。但此法受到其他物质干扰的可能性较大,因此需要对样品进行预处理。3. 紫外吸收法 紫外吸收法是...
测定蛋白质含量
的
方法
答:
2、
双缩脲法
双缩脲法是一种用于
测定蛋白质含量
的经典方法。在碱性条件下,蛋白质分子中的肽键与铜离子反应生成紫色的双缩脲复合物。通过测定溶液在650nm处的吸光度,可以确定蛋白质的含量。3、紫外分光光度法 在紫外分光光度法中,蛋白质中的肽键在280nm处有强烈的吸收。通过测定溶液在280nm处的吸...
双缩脲
试剂是如何检测
蛋白质
?
答:
双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。可通过比色法分析
浓度
。
双缩脲法测定蛋白质
的优缺点:优点:双缩脲法测定蛋白质的测定范围是1~10mg蛋白质,...
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