99问答网
所有问题
当前搜索:
聚丙烯酰胺电泳实验步骤
变性
聚丙烯酰胺
凝胶电泳的
电泳实验步骤
答:
制备顺序为先灌制分离胶,然后在分离胶上灌制浓缩胶: (四人一组)1. 在两块玻璃板间夹以垫条,用手夹住玻璃板放入
电泳
槽主体内,缺口朝外,再插入斜楔板。2. 拿一小烧杯,按下表加入各试剂: (12%分离胶) 单体溶液 4ml 分离胶缓冲液(pH8.8) 2.5ml 分离胶缓冲液(pH8.8) ...
非变性
聚丙烯酰胺
凝胶
电泳
的
实验步骤
答:
1、PAGE胶
电泳
缓冲液配置1)
丙烯酰胺
单体贮液:14.55g丙烯酰胺加上0.45g N,N'-甲叉双丙烯酰胺,先用40mL双蒸水搅拌溶解,直到溶液变成透明,再用双蒸水稀至50mL,过滤。用棕色瓶4°C保存备用。2)浓缩胶缓冲液贮液(0.5mol/L Tris-HCl,pH6.8):3.03gTris溶解在40mL双蒸水中,用4mol/L...
wb
实验
的原理和
步骤
答:
WB
实验
是通过
聚丙烯酰胺
凝胶
电泳
(PAGE)将混合蛋白质样品分离后,利用特殊虹吸或电场装置印迹至固相介质(例如PVDF膜)上,再以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原。 与相对应的第一抗体特异性结合,之后再与酶或同位素标记的第二抗体相结合,最终通过底物显色或放射自显影来检测特异性目的基因表达的蛋白成分。 蛋白质样品制备...
15%变性
聚丙烯酰胺
凝胶
电泳
的
步骤
答:
1、 清洗干净两块玻璃板,晾干后按要求装配好垂直
电泳
板,两块玻璃板的两侧及底部用1%的琼脂糖封边,防止封闭不严而使
聚丙烯酰胺
液漏出。2、 将装好的玻璃电泳板倾斜成45~60℃角。把玻璃板在灌胶支架上固定好。3、 分离胶:按1∶3∶8∶水=1∶2∶4∶1的比例,先将贮备液1,3和水放在一小烧...
SDS
聚丙烯酰胺
凝胶
电泳
的
实验步骤
答:
1.样品的浓缩效应以往不连续
电泳
系统中,含有上、下槽缓冲液(Tris—Gly,pH8.3)、浓缩胶缓冲液(Tris—HCl,pH6.8)、分离胶缓冲液(Tri s—HCl, pH8.8),两种凝胶的浓度(即孔径)也不相同。在这种条件下,缓冲系统中的HCl几乎全部解离成Cl一,两槽中的Gly(pI一6.0,pK a=9.7) 只有很少...
如何做好
聚丙烯酰胺
凝胶垂直板
电泳
,那些是关键
步骤
答:
我做
实验
的时候,最主要是把凝胶制备好。需要注意的有:1、密封条要封好,不能漏水;2、灌胶时用移液管,可以慢一点,并水平移动,防止凝胶不均匀,凝胶不会很快凝固,所以不用担心;3、灌胶时不能有气泡产生,否则会影响后面凝胶的效果。
SDS-
聚丙烯酰胺
凝胶
电泳
测定蛋白质分子量中,如何做好聚丙烯酰胺垂直板电 ...
答:
一,清洁好制胶的玻璃板,一定要尽量用去离子水冲干净,以除去肉眼可见或不可见的杂质 二,根据你目的蛋白的分力量,选择合适的分离胶和浓缩胶 三,如果要获得最佳的胶图,可以一直使用恒流直至
电泳
结束,但要根据实际情况,不能把电流设置过小,防止电泳时间过长,蛋白在胶上会弥散,也不能设置太大,...
western blotting的原理、操作
步骤
及意义
答:
western blot的
实验步骤
及注意事项的资料 1. 把
聚丙烯酰胺
凝胶中的蛋白质
电泳
转移到硝酸纤维膜上。 1)转移缓冲液洗涤凝胶和硝酸纤维素膜,将硝酸纤维素膜铺在凝胶上,用5ml移液管在凝胶上来回滚动去除所有的气泡。 2)在凝胶/滤膜外再包一张3mm滤纸(预先用转移缓冲液浸湿),将凝胶夹在中间,保持湿润和没有气泡...
聚丙烯酰胺
凝胶
电泳实验
操作
过程
中,应注意哪些事项?
答:
一、凝胶制备时:TEMED和AP要后加,加入后用玻棒缓慢匀速的混匀,避免有气泡产生;然后马上注入
电泳
槽内,插入梳子,这时也要匀速,但不能太慢,因为太慢的话底部的胶会比上面的胶凝的快,影响胶的质量,同时小心有气泡;二、加样时要注意:1.每空的上样量不能过大,以免样品溢出,造成各泳道相互...
聚丙烯酰
氨凝胶
电泳
的
实验
材料
答:
一.设备进行凝胶
电泳
的装置见图版4。1)直流电源如果一次进行电泳的管数在20管以内可以用最大电流300毫安的整流器(硅或硒整流器),调压范围0—300伏。2)电泳装置包括二个缓冲液槽和电泳 管。液槽可以用玻璃或塑料制成,在底部钻孔。插入电泳管,用有孔橡皮塞固定。电泳管选用孔径均匀一致的玻璃管...
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
涓嬩竴椤
灏鹃〉
其他人还搜
聚丙烯酰胺电泳的基本原理
sds聚丙烯酰胺凝胶电泳步骤
sds聚丙烯酰胺凝胶电泳实验
聚丙烯酰胺凝胶电泳的载体
聚丙烯酰胺凝胶电泳注意事项
sdspage凝胶电泳的注意事项
二维聚丙烯酰胺凝胶电泳步骤
聚丙烯酰胺凝胶电泳制作方法
酸性样品在浓缩胶中能不能跑