谁做过酶切质粒的实验啊,制感受态细胞然后转化呢?求详细过程及注意要点...答:大肠杆菌的转化常用化学法(CaCl2法),该法最先是由Cohen于1972年发现的。其原理是细菌处于0℃,CaCl2的低渗溶液中,菌细胞膨胀成球形,转化混合物中的DNA形成抗DNase的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面,经42℃短时间热冲击处理,促使细胞吸收DNA复合物,在丰富培养基上生长数小时后,球状细胞复原并分裂增值,被转化的细菌...
大肠杆菌感受态细胞的制备 感受态细胞制备成功关键有哪些答:大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 准备:一.材料 e.coli dh5α菌株:rˉ,mˉ,ampˉ;pbs质粒dna:购买或实验室自制,eppendorf管。二.设备 恒温摇床,电热恒温培养箱,台式高速离心机,无菌工作台,低温冰箱,恒温水浴锅,制冰机,分光光度计,微量移液枪。三.试剂 1.lb固体和液体培养基 2.amp母液 3.含amp...