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电泳拖尾的原因
问一下,就是,请问
电泳
DNA是否出现
拖尾
现象是要怎么判断的?
答:
那琼脂糖凝胶电泳拖尾的几种情况及原因:1. PCR产物出现拖尾的因素有很多,总结为一条,
就是非特异性扩增过多
。原因可能是:(1)
模板不纯
:解决方法,纯化模板 (2) Buffer不合适:解决方法,更换Buffer (3) 退火温度偏低:解决方法,适当提高退火温度 (4) 酶量过多:解决方法,适量用酶,或...
电泳
DNA时,
拖尾
现象很严重,造成这种现象
的原因
有哪些?
答:
电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散。其原因,主要从以下两个方面考虑:
1、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差
,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,
循环次数过多
,而造成PCR的非特异性产物 过多。对策:①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。③适当降低...
PCR产物跑
电泳
时发生
拖尾
,这
是什么原因
造成的?
答:
PCR产物电泳拖尾,
可能有如下原因: a.模板不纯
。b.退火温度偏低。c.酶量过多,dNTP、Mg2+浓度偏高。d.
循环次数过多
。解决办法:a.纯化模板。b.适当提高退火温度。c.降低酶量,适当降低dNTP和镁离子的浓度。d.减少循环次数
pcr产物跑的
电泳
,为什么DNA都有
拖尾
答:
PCR产物电泳拖尾,
可能有如下原因:a.模板不纯.b.退火温度偏低.c.酶量过多
,dNTP、Mg2+浓度偏高.d.
循环次数过多
.解决办法:a.纯化模板.b.适当提高退火温度.c.降低酶量,适当降低dNTP和镁离子的浓度.d.减少循环次数
PCR产物跑
电泳
时发生
拖尾
,这
是什么原因
造成的?
答:
PCR产物电泳拖尾,
可能有如下原因: a.模板不纯
。b.退火温度偏低。c.酶量过多,dNTP、Mg2+浓度偏高。d.
循环次数过多
。解决办法:a.纯化模板。b.适当提高退火温度。c.降低酶量,适当降低dNTP和镁离子的浓度。d.减少循环次数
电泳
时,为何带出现
拖尾
?
答:
A:主要是样品融解效果不佳或分离胶浓度过大引起的。处理办法:加样前离心;选择适当的样品缓冲液,加适量样品促溶剂;
电泳
缓冲液时间过长,重新配制;降低凝胶浓度。Q:为什么带出现纹理现象?A:主要是样品不溶性颗粒引起的。 处理办法:加样前离心;加适量样品促溶剂。Q:什么是“鬼带”,如何处理?A...
跑dna
电泳
出现
拖尾
现象,不知道为何?
答:
也可能是受到了空气的污染等,为了检测你的maker是否有问题,可以在同块胶上点上别的MAKER,或者请别人帮你制胶后再跑一下。2.镁离子的浓度问题,镁离子浓度不合适本身就很容易
拖尾
,前8个样在跑PCR的时候都加了镁离子,而总DNA没有,这也是他们的区别,也可以从这点找找
原因
。
提取的DNA在
电泳
过程中出现严重的
拖尾是什么原因
答:
1、PCR产物自身原因
:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,
循环次数过多
,而造成PCR的非特异性产物 过多。2、
电泳体系的问题
:(1)
电泳缓冲液TAE或者TBE的污染
,建议更换缓冲液。(2)上样时样品漂了,建议增加上样缓冲液的用量,以及小心加样。(3)电压太高...
琼脂糖凝胶
电泳
跑的DNA为什么会
拖尾
答:
由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,
循环次数过多
,而造成PCR的非特异性产物过多。对策:减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶;减少dNTP的浓度;适当降低Mg2+浓度;增加模板量,减少引物的用量,减少循环次数,提高退火温度。琼脂糖的熔点在62〜65°C之间,融化...
蛋白
电泳
拖带
的原因
有哪些
答:
1.我觉得最主要
的原因
是蛋白样品在制样时,煮沸时间不够,没有充分被SDS包被,变性不充分。2.样品有降解 3.上样量太大,分不开 4.有时候,如果蛋白含二硫键的话,还原剂量不足,可能会导致蛋白在跑胶过程中的动态成键,也可能形成
拖尾
。
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