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双缩脲法测定蛋白质含量具体方法
双缩脲法测定蛋白质含量
答:
(1)标准
蛋白
溶液(5mg/ml):准确称取已定氮的酪蛋白(干酪素或牛血清白蛋白)用0.05mol/L氢氧化钠溶液配制,冰箱存放备用。(2)
双缩脲
试剂:溶解1.5g硫酸铜(CuSO 4 ·5H 2 O)和6.0g酒石酸钾钠(NaKC 4 H 4 O 6 ·4H 2 O)于500ml蒸馏水中,在搅拌下加入300ml10%氢氧化...
双缩脲
试剂
测定蛋白质含量
步骤?
答:
操作
方法
,1、标准曲线的制作:于试管中分别加入0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml的1%标准酪蛋白溶液,用水补足1ml。然后各加入4ml
双缩脲
试剂,充分摇匀在室温下反应30min,于540nm波长下测定光吸收率。以酪
蛋白的含量
为横坐标,光吸收值为纵坐标,绘制标准曲线。2、样品测定 取样品溶液1ml加入4...
双缩脲法双缩脲法
答:
双缩脲法是一种利用蛋白质与铜离子形成的紫色络合物来测定蛋白质含量的实验技术
。该方法基于原理,当双缩脲在强碱性溶液中与二价铜离子结合,会形成颜色深浅与蛋白质浓度正相关的络合物。这个反应适用于含有两个酰胺基或相连肽键的化合物,且颜色变化与分子量和氨基酸成分无关,因此适用于快速且相对较少干...
蛋白质含量测定方法
有哪些?
答:
蛋白质含量测定方法如下:一、蛋白质含量测定
1.双缩脲法 双缩脲是有两分子尿素缩合而成的化合物。将尿素加热到180℃,则两分子尿素缩合
,放出一分子氨。双缩脲在碱性溶液中能与硫酸铜反应生成红紫色络合物,称为双缩脲反应。蛋白质中的肽键与之类似,凡是具两个以上肽键的物质均会也能起双缩脲...
蛋白质检测方法双缩脲
答:
蛋白质检测方法
双缩脲具体如下可供参考:一、
双缩脲法
1、双缩脲法是一个用于鉴定
蛋白质的
分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液,呈蓝色,由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时(多肽),试液中的铜与多肽配位,配合物呈紫色。2、可通过比色法分析
浓度
,在...
双缩脲法测定蛋白质含量
计算
答:
双缩脲法测定蛋白质含量
计算如下:学习双缩脲法测定蛋白质的原理和
方法
实验原理:具有两个或两个以上肽键的化合物皆有双缩脲反应。在碱性溶液中双缩脲与铜离子结合形成复杂的紫红色复合物。而蛋白质及多肽的肽键与双缩脲的结构类似,也能与铜离子形成紫红色配位化合物,其最大光吸收在540nm处。其...
怎样用
双缩脲法测定蛋白质
?
答:
双缩脲法
灵敏度较低,但操作简单快速,是生物化学领域中
测定蛋白质含量的
常用
方法
之一,也可用于豆类、油料、米谷等作物种子及肉类等样品测定。2.主要仪器 ①分光光度计。②离心机(4 000 r/min)。3.试剂 ①10 mol�6�1L叫氢氯化钾。②碱性硫酸铜溶液:将lO mI。10 mol...
蛋白质测定
答:
(1)
双缩脲法
是第一个用比色
法测定蛋白质浓度的方法
,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。(2)首先利用标准蛋白溶液和双缩脲试剂绘制标准曲线,将待测血清与硫酸钠在待测试管中混合,并用只加入硫酸钠不含血清的试管作为...
如何鉴定
蛋白质
答:
双缩脲(NH2CONHCONH2)由两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物,在强碱性溶液中,双缩脲与CuSO4形成紫色络合物,双缩脲反应产生的紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来
测定蛋白质含量
。优点:
双缩脲法测定蛋白质的
测定范围是1~10mg...
蛋白质含量测定方法
总结
答:
测定蛋白质
的方法
可分为两大类:一类是利用蛋白质的共性,即含氮量、肽键和折射率
测定蛋白质含量
;另一类是利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸性和碱性基团以及芳香基团等测定蛋白质含量。常见的方法有:凯氏定氮法、
双缩脲法
、酚试剂法及紫外吸收法。
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