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BamHI NdeI 双酶切用哪种缓冲液
如题所述
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其他回答
第1个回答 2012-03-11
TaKaRa的酶的话,用K buffer。
第2个回答 2012-03-25
NEB的话 用Buffer 4
相似回答
Takara的NheI 和
BamHI双酶切
体系表中没有
双酶切缓冲
体...
答:
1、如果你用的是Takara的
酶
,应该就只能分步了,而且
BamHI
还是30度反应,虽然也可以在37度切,但如果是分步切的话还是用30度吧。2、为什么不用NEB的酶呢?可以用buffer1或2同时切(好像是,你需要自己再确认下),而且NEB的这两种酶都有HF酶,效率更高,都可以在buffer4中达到100%的效率。以上,...
Hind
II
I和EcoR
I双酶切用
NEB哪个
缓冲液
,还有
BamHI
和HindIII
双酶切用哪
...
答:
推荐的是buffer 3.1
,但是这个buffer这两个酶都没带,而且因为在3.1中貌似活性都只有50%左右,所以酶的用量得增加,而且时间得加长。如果实在不行,就分别切好了。网页上表格看得比较清楚(https://www.neb.com/tools-and-resources/interactive-tools/double-digest-finder?enzyme1={2F6573A8-32BE-...
双酶切
时
缓冲液
里是否必须含有BSA
答:
2、分步酶切
如果找不到一种可以同时适合两种酶的缓冲液,就只能采用分步酶切。分步酶切应从反应要求盐浓度低的酶开始,酶切完毕后再调整盐浓度直至满足第二种酶的要求,然后加入第二种酶完成双酶切反应。3、使用配有特殊缓冲液的酶进行双酶切(图) 使用配有特殊缓冲液的酶进行双酶切也不复杂。...
双酶切反应缓冲液
不可共用
答:
不可。根据查询双酶切相关资料得知,双酶切反应缓冲液不可共用
。能在最大程度上保证两种酶活性的缓冲液即可用于双酶切。详情双酶切反应 (Double Digests)1、同步双酶切 同步双酶切是一种省时省力的常用方法。
EcoR
I
和HpaI
双酶切用哪种缓冲液
?
答:
哪个公司的?如果是NEB(New England Biolabs)的话,我可以很负责的告诉你,用buffer4,因为我做过,OK。(可以无视EcoRI的星活性)。如果是其它公司的,你可以发消息告诉我,我再帮你想想。PS 用HpaI切后,连接的时候要时间长一些,推荐室温。
pcr产物没有纯化能够直接进行
双酶切
吗
答:
首先,采用的是质粒模板;其次,扩增得到的非单一条带,如果不纯化直接酶切,那么得到的将是带有相应酶切位点的几种片段,继续试验的话,菌落PCR鉴定时可能会出现几种不同大小的条带。第三、PCR产物里面缓冲液并不是合适的
酶切缓冲液
,会极大的影响酶切的效率。甚至于根本就切不开,即便是隔夜酶切也...
为什么
BamH I
和Sal I
双酶切
要
分步酶切
,哪个酶先切?
答:
可能和你用的酶有关系吧!我用的是toyobo公司的
BamHI
和SalI,
双酶切
,没问题。不过双酶切时用的buffer需要根据公司给的产品说明来确定,未必就是BamHI或SalI的buffer。
2021-03-30 用于基因工程的工具
酶
答:
4) Topoisomerase改变共价闭合双链DNA分子的结构 第二节 DNA的切割反应 一,缓冲系统的组成
II
类酶的酶活条件:Tris-HCl PH7.5, 25-50mM;10mM MgCl2 ;NaCl 0-150mM; DTT 1mM 根据不同酶对盐离子要求不同,可将
缓冲液
分为以下三种情况: 高盐:100-150mM 中盐:50-100mM 低盐:0-50mM 二,
酶切
操作 DNA量...
ndei酶切
难吗
答:
NdeI
是常见限制性内切酶,类型是Type
II
restriction enzyme 识别序列(酶切位点)为:单酶切的条件一般为:
双酶切
或多酶切时,需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的
缓冲液
,然后参考上表设置反应体系。如果没有合适的缓冲液可以选择,可以在一种酶消化完毕后进行纯化,纯化完毕后再进行另外一种酶切...
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