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在凝胶层析中要想得到好的层析结果应注意哪些问题和采取哪些措施?
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第1个回答 2020-04-21
1 柱填充要均一,决不能出现气泡.在装柱时候要缓慢倒入凝胶,并轻轻敲打柱身赶走气泡.
2 柱上表面要平,平衡柱时间要长一些,让凝胶充分沉积为均一的柱床.
3 上样体积要少,因此最好浓缩样品.
4 柱床上表面不能干燥,要有1~2cm流动相覆盖.
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凝胶层析
操作
中应注意
哪几
问题?
答:
洗脱速度也会影响凝胶层析的分离效果,
一般洗脱速度要恒定而且合适.保持洗脱速度恒定通常有两种方法
,一种是使用恒流泵,另一种是恒压重力洗脱.洗脱速度取决于很多因素,包括柱长、凝胶种类、颗粒大小等,一般来讲,洗脱速度慢一些样品可以与凝胶基质充分平衡,分离效果好.但洗脱速度过慢会造成样品扩散加剧、区带...
影响
凝胶
过滤
层析
实验
结果
的因素有
哪些
答:
洗脱速度也会影响凝胶层析的分离效果,
一般洗脱速度要恒定而且合适.保持洗脱速度恒定通常有两种方法
,一种是使用恒流泵,另一种是恒压重力洗脱.洗脱速度取决于很多因素,包括柱长、凝胶种类、颗粒大小等,一般来讲,洗脱速度慢一些样品可以与凝胶基质充分平衡,分离效果好.但洗脱速度过慢会造成样品扩散加剧、区带...
凝胶
过滤
层析
法加样是
应注意哪些问题?
答:
加样、洗脱淋洗
。装柱是需要注意的是:【1】垂直放置 【2】放置产生气泡 【3】放置柱分层 加样时,【1】加样前打开出口,使展开剂流出,至正好露出凝胶上平面时,立即关闭出口 【2】加样时,用滴管缓缓沿柱内壁加入柱子 【3】打开柱子得出口,使待分离的样品进入柱子。加样完成后,进行洗脱。
凝胶层析中获得
理想纯化
结果应该注意哪些
关键步骤
答:
蛋白质的分离纯化在生物化学研究应用中使用广泛,是一项重要的操作技术。 一个典型的真核细胞可以包含数以千计的不同蛋白质,一些含量十分丰富,一些仅含有几个拷贝。为了研究某一个蛋白质,必须首先将该蛋白质从其他蛋白质和非蛋白质分子中纯化出来。
凝胶层析
法
中注意
事项,
哪些
对富集casein这一
结果
影响最大
答:
凝胶层析
又称分子筛过滤、排阻层析等。它的突出优点是层析所用的凝胶属于惰性载体,不带电荷,吸附力弱,操作条件比较温和,可在相当广的温度范围下进行,不需要有机溶剂。
凝胶层析
分离混合蛋白质的实验现象和实验
结果
是什么
答:
相对分子质量大的先出来,小的后出来 .血红蛋白呈现红色,当红色带下移到下端口时开始收集,可以收集到血红蛋白
凝胶层析
的应用有
哪些?
答:
(1)作为分析工具:分子量相差比较大的混合物可以用凝胶层析进行分析。
在凝胶层析
的基础上配合使用纸层析或薄层层析技术可以鉴别出各个析离成分。(2)作为脱盐工具:高分子(如蛋白质核酸、多糖等)溶液中的盐类杂质可以借助凝胶层析技术将其除去,这一操作称为脱盐,凝胶层析技术脱盐速度快而完全,而且蛋白质...
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答:
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