与经典色谱比较优点：
与气相色谱比较：
按固定相聚集状态：液液色谱法、液固色谱法
按分离机制：分配、吸附、离子交换、分子排阻四类基本机制
其他分离机制：亲和色谱法、手性色谱法、胶束色谱法、电色谱法、生物色谱法
目前最常用固定相是化学键和相，称为化学键和色谱法
键合相：通过化学反应将有机基团键合在载体表面构成的固定相
正相NP、反相RP
采用氰基、氨基等作为固定相，非极性或弱极性溶剂为流动相。
分离极性至中等极性分子行化合物
分离机制一般认为是分配，也有认为是吸附如形成氢键的
一般规律：剂型强的组分容量因子k大，后出。流动相极性增强洗脱能力增强
十八烷基硅烷、辛烷基硅烷等，有时也用弱极性或中等极性
流动相以水作为基础溶剂再加一定量极性调整剂
分离机制有争论，多种理论模型
影响组分保留行为的主要因素：
分离非极性至中等极性组分
离子对色谱法（IPC）分正相和反相，正相已经少用。
反相离子对色谱法（RP-IPC）是把离子对试剂加入到含水流动相中，使被分析组分离子在流动相中与离子对试剂的反离子生成不带电荷的中性离子，使组分k增加，用于分离可离子化或离子型化合物
用于生物碱类、儿茶酚胺类、有机酸类、维生素类、抗生素类药物分析
离子色谱法：将离子交换色谱与电导检测器相结合分析各种离子的方法
可以分析无机和有机阴阳离子，氨基酸、糖类、DNA和RNA的降解产物
分为抑制型（双柱型）、非抑制型（单柱型）
对于X - 离子：
双柱型使用两根离子交换柱，一根为分离柱，填有低交换容量的阴离子交换剂，另一根为抑制住，填有高交换容量的阳离子交换剂，两者串联。进入分离柱的组分X - 按正常离子交换色谱分离，在进入抑制柱，除去组分中的OH - 从而使本底电导率降低，利于较大电导率HX的检测。
非抑制型可使用更低交换容量的固定相，浓度很低、电导率很低的流动相，这样本底电导率低，试样离子被洗脱后可直接被电导检测器检测
利用手性固定相（CSP）、手性流动相添加剂（CMPA）分离分析手性化合物的对映异构体的色谱方法。还有间接法（加入手性试剂使一对对映体转变为非对映体用常规方法分离）。
环糊精（CD）也是一种手性选择剂，分离机制主要是由于分子内熟睡空腔的动销和多手性中心的作用，如果对映体能被空腔紧密包络，而且与CD分子外沿的仲醇基作用，则被固定相保留，两对映体与CD作用程度不同从而分离。
亲和色谱法（AC）利用或模拟生物分子之间的专一性作用，从复杂试样中分离和分析能产生转移性亲和作用的物质的一种色谱方法。选择性最高。
要求：颗粒细且均匀、传质快、机械强度高、耐高压，化学稳定性好
液固：全多空硅胶、高庚子多空微球
应用最多的是化学键和相
要求：化学稳定性好；适宜溶解度；与检测器相适应；纯度高；粘度低
使用前经微孔滤膜过滤，除去固体颗粒，还要脱气处理
分离方程式：
选择合适的溶剂强度使组分k在最佳范围内，选择合适种类的溶剂改善选择性使α增大获得良好分离度R>1.5
在化学键和色谱中溶剂洗脱能力即溶剂强度直接与它的极性相关。
溶剂极性用溶剂极性参数表示 ，用以表示正相色谱中洗脱能力
反相键合相色谱溶剂强度用另一强度因子S表示
混合溶剂可以用P或S的加权平均表示
HPLC速率理论方程：
尽可能减小柱外死体积
（349页图）
高效液相色谱仪一般由高压输液系统、进样系统、色谱柱分离系统、检测系统和数据处理系统组成
分类：
要求：灵敏度高、噪声低、线性范围宽、重复性好、适用范围广
紫外检测器UVD：不破坏样品，只能检测有紫外吸收物质、对流动相有限制
荧光检测器FD：灵敏度更高，只适用于产生荧光物质，体内药物分析常用
电化学检测器ECD：极谱、库仑、安培、电导。电导用于离子检测，安培应用广泛，灵敏度高适用于痕量组分分析，凡是具有氧化还原活性的都能进行检测
蒸发光散射检测器ELSD：适用于挥发性低于流动相的组分，用于糖类、高级脂肪酸、磷脂、维生素、氨基酸、三酰甘油及甾体；对各种物质几乎有相同响应；但是灵敏度低，流动相必须是挥发性不能含有缓冲盐。
仪器自动化：
采集和分析色谱数据：
中心计算机控制系统：
超高效液相色谱法UPLC：借助于HPLC理论及原理，利用小颗粒固定相，非常低的系统体积及快速检测手段等技术，使分离度、分析速度、检测灵敏度及色谱峰容量大大提高，从而全面提升了液相色谱的分离分析效能。
操作条件比较（355表）
优点：分析速度快；分离效能高；灵敏度高——小颗粒技术和整体化仪器设计
van Deemter方程，可以发现固定相粒度越小，分离度越大。同时粒度越小，最佳流动相线速度越大，并有更宽优化范围，因此降低粒度可以提高分析速度。但是会增加系统柱压差，受到固定相机械强度和色谱仪系统耐压性限制
常用外标和内标，少用归一化。对药品中杂质含量测定常用主成分自身对照法
主成分对照法分为不加校正因子和加校正因子两种：
注意进行色谱系统适用性试验：理论塔板数、分离度、拖尾因子和重复性