99问答网
所有问题
求助帖?请问18S rRNA的Q-PCR引物是怎么设计的
如题所述
举报该问题
其他回答
第1个回答 2017-08-01
18S的全称是ribosomal protein 18,你用这个找找能不能找到,一般来讲都会有的。而且,在NCBI上查找数据,先不要缩小查找范围,选择All Datebases 更好吧
相似回答
PCR引物怎么设计?
答:
1、
引物的
长度一般为15-30 bp,常用的是18-27 bp,但不应大于38,因为过长会导致其延伸温度大于74℃,不适于Taq DNA聚合酶进行反应。2、 引物序列在模板内应当没有相似性较高,尤其是3’端相似性较高的序列,否则容易导致错配。引物3’端出现3个以上的连续碱基,如GG...
pcr
扩增的
引物怎么设计
答:
1. 引物长度:
引物的
长度通常在18-30个核苷酸之间。较短的引物可能特异性不足,而较长的引物则可能导致引物间互补配对,形成引物二聚体,从而影响
PCR
效率。2. GC含量:GC含量(鸟嘌呤和胞嘧啶的含量)应在40%-60%之间。过高的GC含量可能导致引物在退火时形成稳定的非特异性配对,而过低的GC含量则可...
PCR引物设计怎么
做 啊?跪求!
答:
PCR引物设计的
目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列。因此,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。要
设计引物
首先要找到DNA序列的保守区。同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构。如这个区域单链能形成二级结构,就要避开它。如这一段不能形成二级结构,那就可以...
怎样在NCBI的primerblast里
设计Q-PCR的引物?
答:
方法/步骤 1、首先打开NCBI,选择“Nucleotide”,并在搜索框输入基因名。一般用目标基因的突变体1去
设计引物
,也就是要选择目标基因的“transcriptvariant1,mRNA”,没有1就用2、3,以此类推。因为是
Q-PCR
,所以要去掉内含子,因此用mRNA。2、从上一个页面点击FASTA,可以看到mRNA的序列。3、搜索“...
从真菌中提取出未知DNA,
怎么设计引物
来进行
PCR
扩增
答:
要知道是哪种真菌就好办了,找到这个真菌的英文名称(学名),到NCBI找这个真菌的
18s的
rDNA的DNA序列,根据这个序列用软件
设计引物
做
PCR
。如果不知道是哪种真菌,知道真菌属于哪个分类属的话,就根据这个属的18s的rDNA的DNA序列,设计简并引物做PCR,简并
引物的
退火温度要根据情况调低。
pcr引物设计的
基本原则有哪些
答:
PCR引物设计的
11条黄金法则 1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。 DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因,通过序列分析软件(比如DNAman)比对(Alignment),各基因相同的序列就是该基因的保守区。2.引物长度一般在15~30碱基之间。 引物长度(primerlength...
...
是怎么设计的?
两个
引物
的关系以及在
PCR中
起的作用。
答:
PCR中
,两个引物分别与目地DNA的2条子链的两端互补,也就是如果从图的平面来看:一个引物与上一条链的左端互补,另一个引物与下一条子链的右端互补。所以两个
引物的
序列是不相同的,这样才不会乱。引物的作用:有了引物分别与子链互补,那些单个的脱氧核苷酸才能够开始连接上去。
在R
Q-PCR
中,管家基因的
引物
应如何设置?谢谢
答:
housekeeping gene的
引物设计
与你想探测的目标基因引物设计方法相同,而且一般文献上都应该给出,遵照文献使用即可,一般问题都会出在目标基因的引物设计上。不过在
q-PCR
中,housekeeping gene 引物还需注意以下几点 1. 首先找到合适的housekeeping gene,其表达应具有一致可参考性。2. 引物长度在17-22bp。3...
用
18s
rRNA
做RT-
PCR的
内参时,可以用oligo dT做反转录吗?
答:
这个是不行的,需要用random primers来做反转录
引物
。oligo dT适合真核生物的mRNA的反转录,而这个 rRNA不同于mRNA,没有polyA尾巴,因此用oligo dT是不能反转录出
rRNA的
。反转录过程由反转录酶催化,该酶也称依赖RNA的DNA聚合酶(RDDP),即以RNA为模板催化DNA链的合成。合成的DNA链称为与RNA互补DNA...
大家正在搜
Q是谁
Q是啥
Q是
1Q
帖经
三帖
帖然
谭念帖
逃暑帖
相关问题
新手求助关于荧光定量PCR引物设计问题
求助miRNA QRT-PCR引物设计
rt-pcr和pcr引物设计为什么会有不同
实时荧光定量pcr引物怎么设计
荧光定量PCR引物设计 普通pcr引物设计和荧光定量pcr引...