ATMT法介导真菌遗传转化的应用

Question

如题所述

Answer 1

一、利用基因敲除研究基因功能
利用基因敲除方法为研究基因功能提供了最直接最有力的证据。
当T-DNA中含有与宿主基因组同源的序列时, T-DNA就会以同源重组的方式整合进基因组, 并且双交换同源重组占相当比例。因此, 将目标基因的部分序列克隆至T-DNA两个边界之间, 构建目标基因的打靶载体, 然后利用根癌农杆菌介导进行转化, 就可以实现目标基因的敲除, 进而根据表型变化来研究该基因的功能。

二、利用基因插入突变标记、克隆相关基因
插入突变是另一个反向遗传学的研究方法。当T-DNA中不存在与受体染色体同源序列时, T-DNA主要以异源重组形式整合进染色体基因组中。因此可利用T-DNA标签法产生插入突变从而分离克隆真菌相关基因 (Li Nestri Nicosia et al., 2001)。
Reference：
[1]迟彦,周东坡,平文祥,李姗姗,朱婧.根癌农杆菌介导的真菌遗传转化及其应用[J].菌物学报,2005(04):142-149.