蛋白胶分离配置时忘加SDS会有什么后果

如题所述

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第1个回答 2022-03-30

不凝固
_涫蹬艿鞍椎木郾_0方菏强梢杂美磁芎怂岬?,但是需要做一些改变,首先配制聚丙烯酰胺胶时不加SDS,且只需要配制下层分离胶(6%-8%),

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配胶时未加入SDS还能用吗答：sds作用是为了消除电荷影响，按分子量大小分离蛋白或亚基，如果不加，我认为可能会阻碍蛋白的分离，使一些蛋白分不开（电荷，分子量的综合效果）。

做sds-page是,不放sds会有什么影响?答：sds的作用是使得蛋白质包一层膜，屏蔽掉蛋白质在电泳过程中电子的影响，从而电泳中蛋白质的唯一距离之与蛋白质分子的大小有关。我做过没放sds的实验，这样的话蛋白质不能变性，上扬缓冲液中不能放b-巯基乙醇，这样保证蛋白质不变性。电泳出来效果是真是蛋白质的条带。不过有的蛋白质跑不出条带了。

western blot 中甲醇作用答：若不加SDS，蛋白会沉淀在胶上，但SDS过多会影响蛋白与膜的吸附。甲醇能使SDS与蛋白分离，甲醇浓度越高SDS与蛋白分离越快，但高浓度的甲醇对蛋白会有固定作用，不利于蛋白从胶里跑出来。一般来说甲醇的浓度为20%，但PVDF膜截留marker上交联的小分子颜料的能力很差，可考虑提升甲醇的浓度至25%（它对普...

wb进行电转的时候忘记加sds了答：”wb进行电转的时候忘记加sds了方法有检查实验结果、重新制备样品、使用洗涤缓冲液、注意实验操作。1、检查实验结果：在出现这种情况后，需要检查电泳结果是否符合预期，并且观察是否能够观察到目标蛋白带。2、重新制备样品：如电泳结果不符合要求，则需要重新制备样品，并且在制备样品时添加SDS。3、使用洗涤...

基因组提取时没加SDS后果答：最好按照说明书来,不过浓度不太高的情况下几乎没有影响,蛋白酶K可是很强悍的

什么是非变性凝胶电泳答：1. 凝胶的配置中非变性凝胶不能加入SDS，而变性凝胶的有SDS。2. 电泳载样缓冲液中非变性凝胶的不仅没有SDS，也没有巯基乙醇。3. 在非变性凝胶中蛋白质的分离取决于它所带的电荷以及分子大小，不像SDS-PAGE电泳中蛋白质分离只与其分子量有关。4. 非变性凝胶电泳中，酸性蛋白和碱性蛋白的分离是完全...

SDS-PAGE蛋白胶跑到分离胶呈弥散状答：SDS-PAGE蛋白胶跑到分离胶呈弥散状,浓缩胶120V跑成一条直线的时间也比较长,大约20min,分离胶就出现弥散状现象(如图),染色脱色后跑出来的胶图还可以,只是条带稍微没有跑开的样子... SDS-PAGE蛋白胶跑到分离胶呈弥散状,浓缩胶120V跑成一条直线的时间也比较长,大约20min,分离胶就出现弥散状现象(如图),染色脱色...

sds-page的电极缓冲液和分离胶,浓缩胶缓冲液里为什么也要加入一定量的s...答：我的理解是在整个电泳体系中都保持一定的SDS浓度，以保证蛋白质与SDS的充分结合，不然可能影响电泳效果。

蛋白电泳时SDS在胶里的电泳情况,跑得有蛋白快吗?答：SDS是带有负电的分子,所以在电泳中应当会移动.SDS分子量只有几百,比动辄几万几十万的蛋白质分子小很多,所以理论上比蛋白质分子移动快.对于蛋白质电泳中SDS作用,比较重要的是它会结合在蛋白质分子表面,使得蛋白质分子带负电,促进蛋白质分子的移动.

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