分离胶和浓缩胶的区别是什么

如题所述

第1个回答  2022-12-11

一、性质不同

1、浓缩胶:在不连续聚丙烯 酰胺凝胶电泳中,同一介质的凝胶浓度分为 两种,负极的加样侧一般浓度为2%〜5%。

2、分离胶:不连续缓冲体系聚丙烯酰胺凝胶电泳中的一部分,其组成、缓冲液pH和凝胶孔径与浓缩凝胶不同。它具有分子筛效应的小孔径凝胶。

二、过程不同

1、浓缩胶过程:由于浓缩胶浓度低、孔径大,分离胶浓度高,孔径小。带电蛋白质或核酸离子在大孔径凝胶中运动时,阻力小,运动速度快。当接近小孔径凝胶时,阻力较大,移动速度减慢,使样品浓缩,形成窄带,减少电泳过程中的带扩散。

2、分离胶过程:蛋白质或核酸在电泳过程中由浓缩胶进入分离胶,由于分子筛的作用,小分子物质容易通过,阻力小,迁移速度快。大分子由于较大的电阻而滞后。因此,即使具有类似净电荷和相等的游泳率的物质,也会根据分子量的不同而通过分子筛效应从凝胶中分离出来。



扩展资料:

浓缩胶的作用有堆积作用,凝胶浓度较小,孔径大。将较细的样品加入到浓缩胶中,通过大孔凝胶的迁移浓缩到窄的区域。当样品液和浓缩胶选pH6.8的TRIS/HCL缓冲液,电极液选TRIS/甘氨酸。电泳开始后,HCL解离成氯离子,甘氨酸解离少量甘氨酸自由基离子。

蛋白质带负电,所以它们一起移动到正极。氯离子是最快的,甘氨酸是最慢的,蛋白质在中间。电泳开始时,氯离子游动速率最高,超过蛋白质,在电泳的背面形成一个低电导区,电场强度与低电导区成反比,从而产生较高的电场强度。

使蛋白质和甘氨酸离子快速运动,形成稳定的界面,使蛋白聚集在移动界面附近,浓缩成一中间层。大大提高了电泳的灵敏度。

参考资料来源:百度百科-浓缩胶

参考资料来源:百度百科-分离胶

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