照真菌培养基的处方及制法，加入15～20g琼脂，调节pH值使灭菌后为6.4±0.2,分
装，灭菌，趁热斜放使凝固成斜面。
上述培养基分别按15ml与40ml或需要量分装于试管功其他容器中，装量约为试管或
容器高度的2/5，按规定的温度和时间灭菌。细菌培养基经30～35℃培养48小时,真菌培
养基经20～25℃培养72小时后，应无菌生长。 【附注】 肉浸液制备法 取新鲜牛肉，除去肌腱及脂肪，切细，绞碎后，每1000
g加水3000ml，充分拌匀，在2～10℃浸泡20～24小时，煮沸1小时，滤过，压干肉渣,补
足液量，分装，灭菌，置冷暗处备用。也可用牛肉浸出粉3g，加水1000ml，配成溶液代
替。
培养基质量应通过灵敏度检查。
菌种 培养基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得超过5 代（从菌种保藏中心获得的冷冻干燥菌种为第O 代），试验用菌种应采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以保证试验菌株的生物学特性．
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）[CMCC (B) 26003]
铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa) [ CMCC (B) 10104]
枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis) [CMCC (B) 63501]
生孢梭菌（Clostridium sporogenes）[ CMCC ( B )64941]
白色念珠菌（Candida albicans) [ CMCC ( F) 9800l]
黑曲霉（Aspergillusn niger) [ CMCC (F) 98003 ]
菌液制备 接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中或营养琼脂培养基上，接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30～35 ℃ 培养18～24 小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中或改良马丁琼脂培养基上，20～25 ℃ 培养24～48 小时，上述培养物用0.9 %氛化钠溶液制成每lml 含菌数小于100CFU （菌落形成单位）的菌悬液。接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂培养基上，23～28 ℃ 培养5～7 天，加入3～5ml 无菌的含0.05 % (ml/ml）聚山梨酯80的0.9 %氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用无菌的含0.05 %〔ml/ml）聚山梨酯80 的0.9 %氯化钠溶液制成每lml 含孢子数小于10OCFU 的孢子悬液。菌悬液在室温下放置应在2 小时内使用，若保存于2～8 ℃ 可在24 小时内使用。黑曲霉孢子悬液可保存在2～8 ℃ ，在验证过的贮存期内使用。
培养基接种取每管装量为12ml 的硫乙醇酸盐流体培养基9 支，分别接种小于100CFU 的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌各2 支，另1 支不接种，作为空白对照，置30～35 ℃ 培养3 天；取每管装量为9 ml的改良马丁培养基5 支，分别接种小于100CFU 的白色念珠菌、黑曲霉各2 支，另1 支不接种，作为空白对照，置20～25 ℃ 培养5 天。逐日观察结果。结果判定空白对照管应无菌生长，若加菌的培养基管均生长良好，判该培养基的灵敏度检查符合规定。
