微生物检测操作工个人工作总结
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自从本人接管微生物实验室以来,发生过大大小小的实验室偏差,现在就各类偏差现象谈谈个人看法:
由于微生物的特殊性,微生物检测异常结果的调查与评价较理化检测更为复杂和困难,因为
1样品在环境中的均一性较差(即 分布不均)
2微生物的不稳定性--因为药品检验的对象是具有繁殖能力的活细胞生物,其能因存放时间的延长而死亡亦或大量繁殖
3检验周期长--需待其形成肉眼可见的菌落,一般需72小时
4检验过程中影响因素较多,如微生物的生理状态,样品的抑菌性,培养基灵敏度,培养温度
所以,尽管我们执行检验规程和sop,在实际操作中也难免会有实验室偏差,因此微生物实验室有必要制定适当的偏差处理方法,
个人认为:对于微生物实验室偏差,检验员应端正心态,以科学严谨的态度去面对,切勿隐瞒(特别是超标偏差), 当出现偏差,当事检验员应有清晰的分析思路:从一切可能的角度去调查,从而有针对性的去处理偏差,得出正确的实验结果..实验室负责人应在接到异常或超标结果的报告后,及时向部门经理汇报情况,
然后按以下步骤进行调查分析偏差原因并作出适当处理,
1检查所有的 玻璃仪器,工具,溶液,样品是否正确
微生物限度检验所用玻璃仪器,稀释剂:极少会出现染菌现象, 因为其灭菌规程成熟且简便,一般可对其进行彻底灭菌,若还是出现问题,则可能是设备性能不达标或保存过程中受到污染了.
另:如研钵等能用干热灭菌的器皿则尽量用干热法灭菌,因为湿热法灭菌后的物品会因带有水蒸气--冷凝而成少量水附着于物品表面和内壁,若不及时将其烘干,则易滋生微生物造成不必要的污染,
2与检验员讨论检验方法,确认无方法和操作方面的问题
微生物限度检查中制备供试液所用到的乳化剂,分散剂有聚山梨酯80,十四烷酸异丙脂,其能将一些非水溶性的供试品(硬脂酸镁)在稀释剂里充分混匀,达到"供试液均匀一致"的效果,使被检样品更具代表性,为了便于观察某些细菌,在细菌检查培养基中还可加入一显色剂,如TTC,其最终浓度为0.001%,若过高则会对细菌的生长有抑制作用
在检查抗菌药物时,可以在供试液制备过程中(或在培养基里)加入中和剂,其用量应在方法验证过程中确定.
例1:在检查青霉素类药物如 阿莫西林胶囊时,则可在稀释剂或培养基中加入青霉素酶,其能完全特异,迅速的使青霉素灭活,,从而使青霉素失去抑菌,杀菌的.作用.
例2:在检查喹诺**类抗菌药时,可根据其理化性质:3,4位羧基与**羰基,容易和金属离子如,钙,镁,铁,锌等形成螯合物降低药物的活性.在稀释剂或培养基中加入MnSO4(0.1mol/L)
3检查在相关时间段其他样品或同类样品的检测结果 和 微生物菌落形态
也可参考当天/当次检验其他检品的检验结果,有类似异常情况发生,可根据所检查微生物菌落形态作出相应的判断.微生物在液体培养基(如营养肉汤,改良马丁培养基)中的培养特征会有:形成菌膜/形成沉淀/浑浊,在固体培养基(营养琼脂,玫瑰红钠琼脂)上的形态有:菌落表面形态—圆形,根状,不规则形,菌落隆起形状—隆起,扁平,凸起,脐状凸起,菌落边缘形状—边缘整齐,裂叶状,波状,丝状,锯齿状,
举例:金黄色葡萄球菌,在营养琼脂平板上,经37度培养24-48小时后,产生金黄色脂溶性色素,呈金黄色,菌落较小,,直径多在0.8-1.5mm之间,圆形,凸起,边缘整齐,表面光滑,湿润,不透明之菌落.
4洁净室洁净度的控制
为了维护医药实验用洁净室环境的稳定性,确保实验结果的准确性,对洁净室环境质量应采取合理的控制措施和评价方法是非常重要的无菌技术主要指在微生物实验工作中,控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施,其中包括无菌环境设施无菌实验器材以及无菌操作等,无菌环境是指人们用物理的或化学的方法,在某一可控的空间内使微生物数量降低到最低限度,接近于无菌的一种空间,医药企业中，消毒与灭菌是微生物实验技术中最基本的操作，消毒是指对病原微生物的繁殖体的致死作用，但不能杀死芽孢等全部微生物.所以,消毒是不彻底的,不能代替灭菌.凡用于消毒的化学药品称为消毒剂,其有液体的,固体的,和气体的，消毒剂种类很多,性质不一,因此应根据具体情况选择既安全又有效的消毒剂.关于消毒剂的类型于影响因素详见 本人的PPT资料<消毒剂>.
无菌操作一般是指在无菌环境条件下,使用无菌制品或无菌器材进行检验或实验的过程中,能防止微生物污染与干扰的一种常规操作方法,其目的有一是保证待检验物不被环境中的微生物污染,二防止被检微生物在操作中污染环境或感染操作人员,个人认为:药品微生物限度检验无菌操作,应遵循"有菌观念,无菌操作"的原则,严格按SOP进行各项无菌操作,详见<药品微生物检验学手册>308页, :检验员应在无菌操作的基础上,尽量提高操作的准确性,进一不提高检验结果的准确性
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