分光光度法测定槐花中总黄酮的含量

如题所述

第1个回答  2023-12-04

分光光度法测定槐花中总黄酮的含量如下:

提要黄酮类化合物是具有苯骈呲喃环结构的一类天然化合物的总称,一般都具具有4位基,且呈现黄色。黄酮类化合物多分布于植物中,大多数以昔的形式存在。黄酮类化合物中的3-基、4-基或5-基、4-基或邻二位酚轻基与铝盐进行络合反应,在碱性条件下生成红色的络合物。

本方法对样品中黄酮类化合物进行提取纯化后,用分光光度法于510mm波长下测定其吸光度,与芦丁标准品比较,进行待测物中总黄酮的定量测定。其中需要注意的有

(1)万法精密度:对同一样品在相同条件下,重复测定6次,其相对标准差为4.4%。

(2)方法回收率:对总黄酮含量为1.52%的减肥茶加入相似浓度的芦丁标准品进行回收试验,其其平均添加回收率为103.2%。

(3)对于以葡萄、山植等有色水果为原料的样品,可用未加铝盐试剂的样液为空白或采用标准加入法进行测定,以避免样液颜色对测定干扰而引起结果偏高。

扩展资料:

分光光度法定义

是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的方法。它具有灵敏度高、操作简便、快速等优点,是生物化学实验中最常用的实验方法。

许多物质的测定都采用分光光度法。在分光光度计中,将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时,便可得到与不同波长相对应的吸收强度。

分光光度法定量方法

1、标准管法

将待测溶液与已知浓度的标准溶液在相同条件下分别测定A值,然后按下式求得待测溶液中物质的含量。CT=(AT/AS)*CS

2、标准曲线法

先配制一系列浓度由小到大的标准溶液,分别测定出它们的A值,以A值为横坐标,浓度为纵坐标,作标准曲线(A~c工作曲线),可以求出标准曲线的回归方程。在测定待测溶液时,操作条件应与制作标准曲线时相同,以待测液的A值从标准曲线上查出(得到)该样品的相应浓度。

3、吸光系数法

当某物质溶液的浓度为1mol/L,厚度为1cm时,溶液对某波长的吸光度称为该物质的摩尔吸光系数,以ε表示。ε值可通过实验测得,也可由手册中查出。例如亚铁氮二杂菲配合物的ε值等于11000L/cm·mol,已知某物质ε值,测出其A值再根据下式便可求得样品的浓度:c=A/ε。

相似回答
大家正在搜