扫描电子显微镜样品制备技术化学方法制备样品

如题所述

第1个回答  2024-07-11

扫描电子显微镜样品的化学制备过程包括一系列细致的步骤:


首先,对生物材料进行清洗,以去除表面的异物。这些异物可能包括血液、细胞碎片、消化道残留物、细菌、淋巴液和粘液等。常用生理盐水或等渗缓冲液清洗,有时也会采用5%碳酸钠溶液或酶消化法进行处理,确保观察部位的清晰可见。


接着,进行化学固定,常用醛类如戊二醛和多聚甲醛,有时也会采用四氧化锇进行双固定或单固定。四氧化锇固定不仅能保持组织细胞结构的完整性,还能增加材料的导电性和二次电子产量,从而提升扫描电子显微镜图像的质量,这对于高分辨率成像至关重要。


干燥阶段通常采用临界点干燥技术,通过控制温度和压力,避免水分子在干燥过程中产生表面张力导致的样品变形。对于含水生物材料,先用乙醇或丙酮脱水,然后用醋酸戊酯等中间介质进行置换,最后在临界点干燥器中用二氧化碳、氟利昂或一氧化二氮进行置换,以完成干燥过程。


最后,为了增强导电性和提升图像质量,干燥后的样品会粘合在金属样品台上,并在真空蒸发器中喷镀一层50至300埃厚的金属膜,如金或镍。如果使用离子溅射镀膜机,可以获得更均匀、细小颗粒的金属镀层,进一步优化扫描电子显微镜的成像效果。


扩展资料

扫描电子显微镜样品制备技术(preparationof specimens for scanning electron microscopy):扫描电子显微镜以观察样品的表面形态为主,因此扫描电子显微镜样品的制备,必须满足以下要求:①保持完好的组织和细胞形态;③充分暴露要观察的部位;③良好的导电性和较高的二次电子产额;④保持充分干燥的状态。

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