有区别，区别如下：
区别一：伪娘是指性别为男性但是日常行为以及外表看起来和女人一样，而伪娘指的是外表打扮成异性的样子穿异性的衣服没有性别局限。
区别二：伪娘自身是男性而在心理上接近女生或者心理上就是女生，而伪娘在心理上和自己的性别是相同的，只是外表打扮和性别相反。
区别三：人妖与伪娘的不同之处在于身体特征的变化，人妖由于服用雌性激素，导致乳房发育、男性生殖器萎缩，而伪娘并未服用药物，他们与正常男人的身体特征相同，生理上未做过任何改变，为一般的男性状态。
药娘基本等同于人妖，都是服用含有雌性激素的药物来使自己的身体特征和容貌形象更加趋向女性，由于药娘与伪娘两者之间并不好区分，所以经常会有药娘伪装成天赋党（天生长得女性化）伪娘，这点需要多加注意。
伪娘
伪娘是一个新兴词汇，源自日本ACGN领域，泛指一切通过人为手段（如女装、化妆等）让他人误以为是女性的男性角色，比如《火影忍者》中的白、幽鬼丸。
伪娘拥有与女性相似的容貌、身材，通常他们在穿着女性服饰或进行女性化打扮后带有极强的萌属性。随着伪娘角色的日益增多，越来越多的动漫爱好者开始喜欢伪娘角色。
人妖
人妖（泰语叫：GRATEAI。英语作：Shemale，ladyboy）在泰国人妖主要被称为ladyboy。主要指的是专事表演的从小服用雌性激素而发育的男性。这一类人多集中在泰国，称之为“人妖”。
泰国究竟有多少人妖的问题，泰国还没有一个准确的数字，但是按照泰国2012年的6400万人口计算，以及社会普遍认同人妖在男人中存在的比例为2%计算，人妖存在的人数应该在64万人左右。而处于20-40年龄段的人妖人数应该在40万左右。
扩展资料
伪娘
伪娘作为一个时下较为流行的ACGN领域名词，在一定的群体范围内已经取得了界限突破，成为了一个在现实中也可通用的词汇。伪娘作为一种客观的生态现象是一直存在的，只是在以前并未出现这个专有名词而已。
需注意的是，因为伪娘一词是在汉语和中文ACGN界的独特历史文化环境之中产生的，因而是一个地道的汉语词语，日本尚无此用法，作为对天朝ACGN界使用“伪娘”一词的对应，日本ACGN界广泛采用男の娘（おとこのこ.这里的发音并不是むすめ）的称呼。
虽然天朝与日本各自发展出不同的词，但两个词双方的ACGN界都在相互使用。虽然在天朝，普通大众对于“伪娘”一词的理解和原意不太相同；但在ACGN界，不论天朝还是日本的“お宅”（御宅），对此的认识都是和原意一致的。
人妖
据了解，泰国人妖 是港台叫法。“人”者，说明他是人，“妖”者，说明他是由人变的，妖里妖气。泰语：GRATEAI。英语：Shemale，ladyboy。在泰国人妖主要被称为ladyboy。主要指的是在泰国旅游胜地专事表演的从小服用雌性激素而发育女性化的男性。
部分是变性人(切除了男性外生殖器)，而大部分仍是“男性”，保留男性生殖器，只是胸部隆起，腰肢纤细，完全丧失了生育能力(仍然能够射精)，人妖都很漂亮，外表上和女性区别是通常手脚大，并可通过声音鉴别。
但人妖在法律上是定为男性的。泰国的人妖，主要集中在曼谷和芭堤雅，而尤以芭堤雅为多。芭堤雅是泰国著名的旅游胜地，以美丽的自然风光和未受污染的海岸线而闻名，倚山傍海，四季气候宜人。该城有两个著名的人妖歌舞艺术团，可观看到最高水平的人妖艺术表演。
和有心理需要而要求变性的人不同，人妖是在缺乏内在心理需要的情况下对身体的强制扭曲。由于特殊的社会环境和原因，人妖沦为供人欣赏的取乐对象。人妖本身为男性，因而更了解客人的心理特点，能够提供更加周到的服务，这就使更多的男人对人妖产生喜爱。
参考资料：百度百科：伪娘
参考资料：百度百科：人妖