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测定蛋白质浓度的方法
蛋白质的测定
答:
结算出蛋白质含量。双缩脲法:双缩脲法是第一个用比色法
测定蛋白质浓度的方法
,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。首先利用标准蛋白溶液和双缩脲试剂绘制标准曲线,将待测血清与硫酸钠在待测试管中混合,并用只加入硫酸钠...
紫外吸收法
测定蛋白质
含量
答:
紫外吸收法测定蛋白质含量的优点:简便、灵敏、快速,不破坏蛋白质也不消耗样品,测定后仍能回收使用。低浓度的盐不干扰测定,如生化制备中常用的硫酸铵和大多数缓冲液等。特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测,因为此时只需
测定蛋白质浓度的
变化,而不需知道其绝对值。该
方法
的缺点在于:测定蛋白质含量的...
bca法测
蛋白浓度
原理
答:
常用
浓度的
去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford
蛋白浓度测定
试剂盒。简介 二价铜离子在碱性的条件下,可以被蛋白质还原成一价铜离子,一价铜离子和独特的BCA...
简述考马斯亮蓝法
测定蛋白质
含量的过程
答:
4、冷却:将反应液冷却至室温。5、测定吸光度:在595nm处测定反应液的吸光度值。6、计算:根据标准曲线和吸光度值计算
蛋白质浓度
。考马斯亮蓝法在
测定蛋白质
含量时具有操作简便、反应迅速、颜色稳定、灵敏度高等优点。但同时需要注意该
方法
也受到某些因素影响,如试剂浓度、缓冲液pH值、实验温度等。因此...
考马斯亮蓝法测
蛋白质
含量
答:
未知样品
蛋白质浓度测定
测定方法
同上,取合适的未知样品体积,使其测定值在标准曲线的直线范围内。根据所
测定的
A595nm值,在标准曲线上查出其相当于标准蛋白的量,从而计算出未知样品的蛋白质浓度(mg/mL)。3、注意事项 在试剂加入后的5-20min内测定光吸收,因为在这段时间内颜色是最稳定的。测定中...
求 怎样用紫外分光光度法测
蛋白质
含量
答:
蛋白质的稀溶液由于含量低而不能使用280 nm的光吸收测定时,可用215nm与225 nm吸收值之差,通过标准曲线法来
测定蛋白质
稀溶液的浓度。4、肽键测定法 蛋白质溶液在238 nm处的光吸收的强弱,与肽键的多少成正比。因此可以用标准蛋白质溶液配制一系列50~500 mg/mL已知
浓度的
5.0 mL蛋白质溶液,测定238...
考马斯亮蓝法测
蛋白质
含量原理
答:
考马斯亮蓝法
测定蛋白质浓度的
原理考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue)法测定蛋白质浓度,是利用蛋白质—染料结合的原理,定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏
的方法
。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点,因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。考马斯亮兰G-250...
蛋白质
检验实验步骤
答:
1 g/mL的水溶液。B液:硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。在实验时,需要现在待测液体中先在加入A液,先制造出碱性环境,满足B液与蛋白质反应的条件,这样才可以方便进行蛋白质的检测。一段时间后,如果试管中的液体变为紫色,说明待测液体中含有蛋白质,而且颜色深浅与
蛋白质浓度
成正比。
测定蛋白质的
定量
的方法
有哪些及其原理各是什么
答:
因而正在得到广泛的应用。这一
方法
是目前灵敏度最高的蛋白质测定 法。考马斯亮兰G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合,使染料的最大吸收峰的位置(max),由465nm变为595n m,溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。在595nm下
测定的
吸光度值A595,与
蛋白质浓度
成正比。
蛋白质的测定
bradford法是什么?
答:
bradford法
测定蛋白质
含量,也就是考马斯亮蓝法,其原理是考马斯亮蓝在游离状态下呈棕红色,最大光吸收在488nm; 当它与蛋白质结合后变为蓝色,蛋白质—色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝结合在2min左右的时间内...
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