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大肠杆菌质粒dna大小
大肠杆菌
表达菌株JM109,Top10,Rosetta各自有什么特点啊,如何选择?_百度...
答:
大多数
大肠杆菌
菌株中含有Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶,前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基,后者在CCA/TGC序列的第一个胞嘧啶 C-5位置上引入甲基。 常用的菌株都会产生dam,dcm,从而受到甲基化的影响.部分限制性内切酶对甲基化的
DNA
不能切割,如FbaI和MboI等,一般生物公司提供的内切酶说明中均...
请问
大肠杆菌
一定有
质粒
吗?我们用来做转化的DH52有质粒吗
答:
大肠杆菌质粒DNA
的提取 质粒DNA的提取是从事基因工程工作中的一项基本实验技术,但提取方法有很多种,以下介绍一种最常用的方法:碱裂解法:此方法适用于小量质粒DNA的提取,提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下:1、接1%含质粒的大肠杆菌细胞于2ml LB培养基。2、37℃振荡培养...
人的细胞中
质粒
是如何复制的?
答:
一般分子量较大的质粒属严紧型。分子量较小的质粒属松弛型。质粒的复制有时和它们的宿主细胞有关,某些质粒在
大肠杆菌
内的复制属严紧型,而在变形杆菌内则属松弛型。ColE1
质粒DNA
的复制,是从一个特定的复制起点(ori)开始,并沿着环DNA分子单向性地进行。控制此种质粒DNA复制启动的两种关键因素RNAI和...
求助各位前辈分析一下这张
大肠杆菌质粒
提取电泳图
答:
你是做什么电泳,如果是普通电泳,RNA污染量不大的话可能看不到,如果比较大的话会成弥散的条带,因为在电泳过程中会降解,如果提取的RNA质量较好,电泳过程没有降解掉的话,可能会有一条比较清晰的条带在目的条带的下方,因为RNA电泳比
DNA
跑的快 可以适当延长一下电泳时间或者考虑换一个更小分子量的...
酵母菌中线粒体和
质粒
上的
DNA
都是小型环状的吗
答:
另一类是松弛型
质粒
,当染色体复制停止后仍然能继续复制,每一个细胞内一般有20个左右质粒.一般分子量较大的质粒属严紧型.分子量较小的质粒属松弛型.质粒的复制有时和它们的宿主细胞有关,某些质粒在
大肠杆菌
内的复制属严紧型,而在变形杆菌内则属松弛型.在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体.人工构建...
质粒
小提试剂盒中的p1 p2 p3分别有什么作用
答:
都是通过一定的方法(如加碱裂解)使在细菌内大量扩增的
质粒
释放出来,经过去蛋白去RNA等一系列步骤纯化
DNA
,最终将DNA提取出来。配方是:1 Mol/L Tris-Hcl(pH8.0) 25mL 0.5Mol/L EDTA-NaOH(pH 8.0) 20mL 20%葡萄糖 45mL H2O 910mL Rnase(RNA酶,zhi100U) 10-20uL ...
质粒
提取的注意事项
答:
首先,质粒的提取可分为质粒小提、质粒中提、质粒大提。目前大多数实验室都选用试剂盒进行提取,可以根据实验的不同需求,选择相应的试剂盒。质粒小提主要用于用于
大肠杆菌
中
质粒DNA的
小量提取,获得的质粒可以用于常规的载体构建,一般适用于5ml以下菌液。而质粒中提,在小提的基础上可以进一步去除菌液中...
质粒
提取的注意事项
答:
首先,质粒的提取可分为质粒小提、质粒中提、质粒大提。目前大多数实验室都选用试剂盒进行提取,可以根据实验的不同需求,选择相应的试剂盒。质粒小提主要用于用于
大肠杆菌
中
质粒DNA的
小量提取,获得的质粒可以用于常规的载体构建,一般适用于5ml以下菌液。而质粒中提,在小提的基础上可以进一步去除菌液中...
大肠杆菌
基因组DNA提取和
质粒DNA
提取的异同点?
答:
提取的步骤基本上都属DNA的提取步骤,包括细胞裂解,DNA释放,纯化,最后沉淀溶解。质粒提取过程中,有一个DNA变性、复性的过程,这个与基因组提取完全不同,这是利用质粒是以超螺旋结构存在于
大肠杆菌
中的特殊状态,分离纯化质粒时总是会利用这个特点来分离基因组DNA与
质粒DNA
。
质粒
的分离操作
答:
[注意]1.对
大肠杆菌
可从固体培养基上挑取单个菌落直接进行煮沸法提取
质粒DNA
。2.煮沸法中添加溶菌酶有一定限度,浓度高时,细菌裂解效果反而不好。有时不同溶菌酶也能溶菌。3.提取的质粒DNA中会含有RNA,但RNA并不干扰进一步实验,如限制性内切酶消化,亚克隆及连接反应等。(二)、碱法1、取1.5ml培养液倒入1.5ml...
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