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切割质粒的限制酶能特异性地识别
为什么用同一种
限制酶
处理
质粒
和外源DNA形成方式很多
答:
为什么用同一种
限制酶
处理质粒和外源DNA形成方式很多 (1)
质粒切割
前是双链环状DNA分子,所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键,故不含游离的磷酸基团.从图1可以看出,质粒上只含有一个SmaⅠ的切点,因此被改
酶切割
后,质粒变为线性双链DNA分子,因每条链上含有一个游离的磷酸基团,因此切割后含有两个游离...
限制性内切酶
和核酸外切酶有何异同点?
答:
获得单个的核苷酸。2、核酸外切酶是一类能从多核苷酸链的一端开始按序催化水解3、5-磷酸二酯键,降解核苷酸的
酶
。按作用的特性差异可以将其分为单链的核酸外切酶和双链的核酸外切酶。3、它们不同于一般的脱氧核糖核酸酶(DNase),它们的切点大多很严格,要求专一的核苷酸顺序——
识别
顺序。
...
酶切割
目的基因时候需要使用两种以上不同
的限制酶
进行切割?
答:
为了防止目的基因和运载体自身环化。为保证目的基因正序插入运载体,防止反向连接。
限制性
核酸内切酶是
可以识别
并附着特定的脱氧核苷酸序列,并对每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行
切割的
一类
酶
。
...
限制性内切酶
II
的识别
序列和切点是—↓GATC—。在
质粒
上有
答:
(3)可以连接;因为由两种
限制性内切酶切割
后所形成的黏性末端是相同的(或“是可以互补的”)。
“基因工程中
切割
目的基因和
质粒的限制酶可以
不同.”为什么?
答:
识别
序列有区别--G↓GATCC--
限制酶
1,2都
可以切
,但是--↓GATC--只能有酶2切。懂了么,就是说酶一要识别出6个碱基这样的排序才能切,但是酶二只需要识别出4个这样的排序,酶二的选择性比较低。然后,请给我题目里的那张图~是否在标记基因中存在GATC的序列呢,如果有,酶二会去把他切断,所以...
泳道的片段数和
限制酶切
点数的关系
答:
重组的DNA序列为GGATCT∥CCTAGG,而
限制酶
BglⅡ
的识别
序列为AGATCT∥TCTAGA,根据酶的专一性原理可知,重组DNA分子不能被BglⅡ识别. (2)用限制酶EcoRV单独
切割
时,只能形成一种长度的DNA片段,说明该
质粒
上只有一个EcoRV
酶切
位点;用限制酶MboⅠ单独切割时,能形成两种长度的DNA片段,说明该质粒上...
既然一种
限制酶
是
能识别
一种特定的氨基酸序列 那为什么在剪切目的基 ...
答:
切割目的基因时同种序列当然可以用同种
限制酶切割
;但有时也用不同种
的限制性酶
割。用不同限制酶切割的目的是:保证目的基因和
质粒
(运载体)的准确连接,避免无效连接(如:目的基因—目的基因连接物、质粒自身环化等)过多。可以用不同限制酶切割相同序列的原理:虽然一种限制酶只能
识别
一种特定的...
基因工程里,用两种不同
的限制酶
一起
切割质粒
和含目的基因的DNA,
可以
防止...
答:
取下一段目的基因要切两次,也就是说这里切的两次可以分两种不同
的酶
来切,同样的,载体也需要切两次同样也是用这两种酶来切,这样有两组碱基的互补配对,就可以避免载体和载体配对以及目的基因和目的基因配对。(不太确定啊。。。)
为什么DNA按5’-3’方向复制,
限制酶的识别
就有方向?
答:
而且补充一下,一般这些
切割
出黏性末端的内切酶识别的序列大都是回文序列。我上面说到了,
限制性内切酶识别
的是双链DNA序列,你不用在GAATTC与CTTAAG之间计较,它们两个就是双链DNA的互补序列,你知道识别这段互补序列并且在GA之前切开就行,不要在一道题上不放,关键是理解限制性内切酶的机制。
...请据图回答下列有关问题(1)若
限制酶
Ⅰ
的识别
序列和切点是-↓GATC...
答:
(1)由图可知,质粒上的两个标记基因中均有
限制酶
Ⅰ(-↓GATC-)
的识别
序列和切点,若用该
酶切割
会将两个标记基因均破坏,因此只能用限制酶Ⅱ
切割质粒
,但切割含有抗虫基因的外源DNA分子时可以只用限制酶Ⅰ,也可以同时用限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ.(2)用限制酶Ⅱ切割质粒后会破坏氨苄青霉素抗性基因,不...
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