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RNA提取过程中如何防止降解
提取
组织
RNA时
,
如何
减少
RNA的降解
!
答:
1:所有用到的枪头、离心管都要在0.1%的DEPC水里浸泡过夜够,灭菌烘干使用
。当然这些耗材都有现成商业化的买。2:所有实验中用到水的地方都是0.1%的DEPC水(灭菌失活)。3:
液氮研磨
,裂解时间不宜太长,需要纯化的,粗提出的RNA尽快纯化,不要放太长时间。4:去NDA时,DNA酶处理的时间要短,...
如何防止提取过程中RNA的降解
?
答:
2、实验时戴口罩
,主要是防止呼吸、说话时RNA酶进入试剂中 3、
实验台保持清洁、降低环境RNA酶
4、
RNA提取后,放入-80摄氏度保存,防止降解
RNA提取
的注意事项
答:
1. 把所有接触RNA 的塑料制品以及玻璃制品都高压灭菌
。2. 用于RNA 缓冲液的所有水都要经DEPC 处理。加DEPC 到终浓度0.1% ,再室温放放置过夜,或者灭菌15 min 。DEPC 不能用于Tris 缓冲液,因为DEPC 将会降解成乙醇和二氧化碳。3.
避免碱性缓冲液
,因为RNA 中的羟基对碱非常敏感。4. 将RNA 缓冲...
如何防止
内源性RNA酶对
RNA的降解
答:
1. 使用正确的细胞或组织储存条件 在样品用液氮瞬间冻结之后,应该储存在-80°C,千万不能解冻
。即使是置于含有胍盐的裂解液中作匀浆前的短暂解冻,也会导致RNA的降解和损失。瞬间冻结的组织应该首先在超低温条件下先研磨成粉,然后置于裂解液中进行匀浆。RNAfixer使样品储存更为便利。储存在RNAfixer中的...
如何防止
RNAse对样品中
RNA的降解
?
答:
RNA容易受到环境条件和温度的影响。因此,在
提取
和处理RNA样品时,需要尽快完成操作。如果需要将样品存放一段时间后再进行处理,最好将样品冷冻保存以减少
RNA的降解
。总之,为了
防止RNA
在样品中受到RNase的降解,必须采取多种预防措施。这些措施包括细致的实验室操作、添加RNase抑制剂和RNA保护剂以及尽可能快地...
...做DNA、
RNA提取
实验
时提取
的基因组DNA有
降解
,
如何
解决?
答:
在实验
过程中
注意加入EDTA,因为它是DNA的酶抑制剂,DNA在变性后,可以
防止
DNA被
降解
。在加入碱性溶液破碎细胞后,摇动离心管一定要温和,不能振荡,尽可能上下颠倒混。并且要注意时间间隔做下一步不要太长,这时候也可能破坏了DNA,使其降解,所以一定要把握好时间。
如何防止提取过程中RNA的降解
答:
通过变性剂破碎细胞或者组织,然后经过氯仿等有机溶剂
抽提RNA
,再经过沉淀,洗涤,晾干,最后溶解。但是由于RNA酶无处不在,随时可能将
RNA降解
,所以实验中有很多地方需要注意,稍有疏忽就会前功尽弃。0T3z(F&_,D6c%^"h6YA6_RNA提取的一般步骤-O:Y+x$p#s8U4M9S所有
RNA的提取过程中
都有五个关键点,即:样品细胞或...
提取
基因组
RNA时
,
怎样避免
产物
降解
?
答:
外源
RNA
酶清除剂,可以搞定。喷洒台面,浸泡处理耗材,去除外源RNA酶清除剂,
避免
其
降解
。
提取
植物
RNA时防降解
的方法是什么?
答:
所有
RNA提取
都要小心操作
防止降解
。首先是保证提RNA的试剂和器皿(tip枪头,离心管、装RNA试剂的试剂瓶等)是绝对没有RNA酶存在的。对于枪头离心管用新的,并且二次灭菌。其他的试剂瓶什么的就要用DEPC水浸泡过夜后高温灭菌。操作
过程
要带一次性手套和口罩,并且时常更换。避免在人多的环境下
抽提RNA
。你...
如何防止RNA提取过程中
发生
降解
答:
我觉得RNA在
提取过程中
并不是很容易
降解
,匀浆可以用匀浆器,机械打磨的效果可能要比手工去 匀浆要高效一点。我用的也是Tripure或trizol,所以并不太清楚应该怎么配试剂,下面的方法可以一试。total
RNA提取
Total RNA extract 1. cell Sample (50mg)+lysis (denaturation liquor) 0.5ml + β巯基乙醇1...
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