99问答网
所有问题
当前搜索:
PCR证明基因已敲除
基于CRISPR/Case9全
基因
组
敲除
文库筛选功能基因
答:
3. 表型筛选:将全
基因
组
敲除
细胞库分成两份,其中一份作为实验组施加筛选压力,如:病毒侵染,药物治疗等;另一份作为对照组。根据耐药性、增殖能力、存活能力等表型筛选细胞。 4. 候选基因的分析:将实验组和对照组的细胞分别抽提基因组,
PCR
扩增sgRNA片段,高通量测序,并进行生物信息学分析。根据筛选目的的不同,分为阳...
高分文章热门测序结果验证方法,解决你的选择困扰
答:
目前,被最为广泛应用的是 CRISPR-Cas9 系统,原理是在向导 RNA(guide RNA, gRNA)和 Cas9 蛋白的参与下,待编辑的细胞基因组 DNA 将被看作病毒或外源 DNA,被精确剪切。可应用于
基因敲除
,基因替换等基础编辑方式,还可以被用于基因激活,疾病模型构建,甚至是基因治疗。斑马鱼模型 目前,斑马鱼已成为...
什么是成纤维细胞生长因子(FGF)蛋白
答:
通过同源序列
PCR
法,已经发现了6种新的FGFs
基因
( FGF10、 FGF16、FGF17、FGF18、 FGF20、FG F21)〔4〕。虽然T7 噬菌体 cDNA显示法能获得较多的阳性克隆,但不能确认 是新发 现的 FGFs。随着人类基因组结构的解析及其DNA 数据库被公开,通过基因检索进而又发现3 种新的FGFs基因(FGF19、FGF22、FGF23)〔5,6...
怎么将生物的
基因
转到另一个生物体内?
答:
把生物的
基因
转移到另一个生物体内,需要4个步骤,第1获得该基因,并且经过
PCR
技术来扩增该基因片段。第2步是基因表达载体的构建,需要把该目的性和一个载体结合起来,便于转入受体细胞内,这个结合的过程需要用到了基因的针线,一方面要切开DNA,另一方面还要把该基因片段和智力连接起来,所以我们选择了...
信号通路研究思路
答:
根据JBC上面的文章,A调控B
基因
,很多都是通过第三者如转录因子实现的。我再翻出以前自己的Real-time
PCR
实验结果,发现过表达A基因后,转录因子C的mRNA水平...内容涉及受体与配体的结合、受体抗体的制备、受体与G蛋白的相互作用和激动、受体表达和定位、受体内化和翻译后修饰、GPCR与蛋白质相互作用以及如何利用
敲除
和...
深度丨RNA m6A修饰直接调控肿瘤发生吗?这篇Nature有话说
答:
研究发现,METTL3促进大量mRNA翻译效率,
基因
关联分析显示与癌症发生和细胞凋亡相关。RNA-seq和单基因RT-
PCR
分析显示METTL3
敲除
对mRNA稳定性无影响。进一步研究表明,150-200区段的METTL3对相互作用至关重要,破坏这一区域显著削弱翻译效率。实验结果一致
证明
METTL3在不同细胞系中增强翻译并促进癌变进程。综上...
SnapGene简单入手(二)
答:
按照实验需求,质粒构建分为克隆质粒,表达质粒,
基因敲除
质粒,报告质粒,病毒质粒,基因组工程质粒等。 这部分以pEGF-N1为backbone,human p53 coding sequence 为插入序列,用传统的双酶(EcoR I和BamH I)切重组质粒的方法,介绍质粒元件和snapgene的基本操作流程。1...
基因敲除
是怎么回事 我查了下 只看懂它好像是插入抑制基因 也算基因...
答:
简单来说,
基因
敲出就是 破坏原来基因的结构,让其失去活性,或者去除掉生物体内这个基因,以此来观察细胞的表型变化,是研究某基因功能的研究手段。一般都是通过同源重组的方法来改变原来基因的结构,达到
敲除
某个基因的目的。内源性基因就是指宿主自身的基因,基因整合就是两个非同源基因连接起来,所以内...
CRISPR-Cas9
基因
编辑7--测序验证
敲除
答:
因为Taq DNA聚合酶P出来的条带带有A尾,可连接T4载体,因此,任何可以使得P出来的产物带A尾的DNA聚合酶都可以使用。倘若课题组有平端的测序用载体,则可以使用Q5高保真DNA聚合酶。这里
PCR
产物需要考虑能否和后续测序载体匹配。总结如下:(1)
基因
组DNA提取后PCR 由于课题组条件限制,我们只有T4测序载体,...
基因
功能鉴定的方法有哪些?并做简要介绍,谢谢!
答:
1转
基因
技术 2基因敲出技术 3基因沉默技术 转基因技术是将外源基因导入受体细胞,室外源基因随即整合到受体细胞的染色体上,并随者受体细胞的分裂并将外源基因遗传给后代,从而获得携带外源基因的转基因生物方法。基因敲出技术是采用动物胚胎肝细胞介导定向基因转移,使动物体内的特定基因丧失功能的技术...
棣栭〉
<涓婁竴椤
6
7
8
9
11
12
13
14
10
15
涓嬩竴椤
灏鹃〉
其他人还搜