99问答网
所有问题
当前搜索:
蛋白质电泳的基本步骤
电泳
实验怎样进行?
答:
电泳实验是一种常见的生物化学实验方法,通常用于分离和检测生物分子(如
蛋白质
、DNA、RNA等)或颗粒的电荷性质和大小。下面是一般
的电泳
实验
步骤
:1. 制备电泳缓冲液:根据实验所需,制备适当pH值的缓冲液,以维持适当的离子强度和pH条件,通常使用Tris缓冲液或磷酸缓冲液。2. 准备电泳槽:将电泳槽安装...
垂直式
蛋白质电泳的
操作
步骤
?
答:
1.将玻璃板用蒸馏水洗净晾干, 准备2个干净
的
锥形瓶.2.把玻璃板在灌胶支架上固定好.※固定玻璃板时,两边用力一定要均匀,防止夹坏玻璃板.3.按比例配好分离胶,用移液管快速加入,大约5厘米左右,之后加少许蒸馏水,静置40分钟.※凝胶配制
过程
要迅速, 催化剂TEMED要在注胶前再加入,否则凝结无法注胶.注...
WesternBlot
基本
原理及
步骤
答:
(3)上样:用移液枪将制备好
的蛋白
样品注入孔道中,样品两头各加入3μl、1μl marker(一般按照左大右小的原则)。(4)
电泳
:将电泳槽与Power正确连接。设置电压为70v,电泳30min,蛋白都移动到积层胶底部后(肉眼可见一条蓝色的线)。之后设置电压为110v,电泳直至所需的蛋白条带充分展开,Loadi...
什么是双向
电泳
答:
:双向
电泳
完整的操作
步骤
(一)第一向等电聚焦 1. 从冰箱中取-20℃冷冻保存
的
水化上样缓冲液(I)(不含DTT,不含Bio-Lyte)一小管(1ml/管),置室温溶解。 2. 在小管中加入0.01g DTT, Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml,充分混匀。 3. 从小管中取出400ml水化上样缓冲液,...
蛋白质
凝胶
电泳的
详细
步骤
答:
转膜时从下到上,依次是四层滤纸,一层PVDF膜,一层胶,再四层滤纸
。应该注意以下2个方面 1 用玻璃棒将气泡赶净 有气泡的位置不导电 蛋白就转不上 2 半干式转膜仪要保证一定量的转移缓冲液,如果转膜一个小时以上,缓冲液要多一些
SDS-PAGE检测
蛋白质
分子量
的基本
原理
答:
而与蛋白质所带的电荷无关,在一定条件下,
蛋白质的
分子量的对数与
电泳
迁移率间呈负相关。操作
步骤
1、凝胶制备:用两块电泳玻璃板制成垂直板槽(不能漏胶),垂直放置.将配制好的分离胶溶液倒入,滴加入无离子水,待凝胶聚集后,倒出无离子水,用吸水纸吸干,倒入浓缩胶,再插入梳子.2、上样:分别取...
SDS-PAGE检测
蛋白质
分子量
的基本
原理
答:
而与蛋白质所带的电荷无关,在一定条件下,
蛋白质的
分子量的对数与
电泳
迁移率间呈负相关。操作
步骤
1、凝胶制备:用两块电泳玻璃板制成垂直板槽(不能漏胶),垂直放置.将配制好的分离胶溶液倒入,滴加入无离子水,待凝胶聚集后,倒出无离子水,用吸水纸吸干,倒入浓缩胶,再插入梳子.2、上样:分别取...
常见
的电泳
方法
答:
1.等电聚焦
电泳过程
一种利用有pH值梯度的介质,分离等电点不同的
蛋白质
的电泳技术。在一个稳定连续的线性pH梯度的溶液(两性载体电解质)中进行分离,每一种被分离的两性物质都移向与它的等电点相一致的pH位置,在那里不再移动(称为聚焦)。2.等电聚焦
电泳的
特点 使用两性载体电解质,在电极...
电泳
法分离混合
蛋白质的基本
原理是什么?
答:
电泳
前用缓冲液浸润薄膜或滤纸等支持物或用缓冲液直接配置成凝胶,将待分离
的蛋白质
样品加在它的一端或中央,支持物的两端与电极连接,通电电泳。电泳完毕,各个组分分布在不同的区域,用显色剂(蛋白质可用考马斯亮蓝或氨基黑等染色)显色后可以显示出各个组分。氨基酸混合物特别是寡聚核苷酸混合物一次...
试述免疫固定
电泳的
原理,如何鉴定M
蛋白
?
答:
免疫固定
电泳
鉴定M蛋白的方法是:①血清或血浆在醋酸纤维薄膜或琼脂糖凝胶上做区带电泳(6孔);②将有6条空隙的塑料膜覆盖在
蛋白质
表面;③向每空隙内加入一种抗体,由上而下依次加入抗正常人全血清、抗IgG、抗IgA、抗IgM、抗κ轻链和抗入轻链抗体;④反应30min后,洗去游离蛋白,待干燥后染色...
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
涓嬩竴椤
灏鹃〉
其他人还搜
影响蛋白质电泳的因素有哪些
蛋白质可以电泳吗
血清蛋白电泳步骤
影响蛋白质电泳迁移率的因素
蛋白电泳QT
跑蛋白具体步骤
蛋白电泳染色需要多长时间
电泳检测步骤
电泳的检测方法