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蛋白质沉淀被没有共沉淀的蛋白污染
蛋白质沉淀的
定义及蛋白质沉淀的方法有哪些
答:
重金属
沉淀的蛋白质
常是变性的,但若在低温条件下,并控制重金属离子浓度,也可用于分离制备不变性的蛋白质。临床上利用蛋白质能与重金属盐结合的这种性质,抢救误服重金属盐中毒的病人,给病人口服大量蛋白质,然后用催吐剂将结合的重金属盐呕吐出来解毒。
...中如
有蛋白质
残留会有什么现象?如何去除
蛋白污染
答:
在质粒提取中如有蛋白质残留,会出现提取的质粒不纯净的现象,加入溶液III可以去除蛋白污染
。质粒抽主要的目的是为了去除 RNA,将质粒与细菌基因组 DNA分开,然后去除蛋白质及其它杂质,如果去除的不够彻底或者有残留,那么得到的质粒就不会相对纯净。蛋白质的去除,主要是靠不溶解的 K-SDS-蛋白质复合物...
蛋白质的沉淀
反应是什么?
答:
1、可逆沉淀反应:沉淀反应发生后
,蛋白质分子内部结构并没有发生大的或者显著变化。在沉淀因素去除后,又可恢复其亲水性,这种沉淀反应就是可逆沉淀反应,也叫做不变性沉淀反应。属于这类沉淀反应的有盐析作用、等电点沉淀以及在低温下短时间的有机溶剂沉淀法等。2、不可逆沉淀反应:蛋白质在沉淀的同时,...
蛋白质的沉淀
反应
答:
1号管有乙醇,还有缓冲液(缓冲液就是由酸碱组成的),1号管沉淀了,你要说明这是因为乙醇而不是缓冲液啊。所以你需要二号三号管来证明,酸和碱都
没有
使
蛋白质沉淀
(因为变性
的蛋白
质被酸碱溶解了),而且中和之后就发现沉淀出现了,说明沉淀是因为乙醇而不是酸碱。至于甲基红,是为了指示酸碱度,你...
蛋白质沉淀的
原因
答:
盐溶液(比如硫酸铜)使
蛋白质沉淀的
原因不是蛋白质变性而是盐析,少量的盐溶液改变了蛋白质的溶解度,所以在步骤一的时候,溶剂(水)的量相对不足,所以发生了沉淀,但是当加入足够的溶剂(硫酸铜是饱和了,但是蛋白质还能继续溶解),原来析出
的蛋白
质重新被溶解。这里可能有一个认识上的误区,所谓饱和...
为什么说
蛋白质
变性不一定
沉淀
,而沉淀不一定变性
答:
蛋白变性不一定就沉淀。只是空间结构的改变,基本的一级结构
没有
被破坏,一定条件下可以复性。只不过绝大多数条件都相当苛刻。
蛋白沉淀
不一定是蛋白质变性。盐析就是例子,盐析也可以让
蛋白质沉淀
,虽然脱去水化层,肽链未转变为伸展状,二级以上结构为变化。一般认为蛋白质的二级结构和三级结构有了改变或...
什么叫
蛋白质的沉淀
作用?
答:
(一)可逆沉淀作用:在发生沉淀作用时,虽然蛋白质已经沉淀析出,然而其分 子内部结构并没发生明显的改变,仍保持原有的结构和性质。如除去沉淀因 素,蛋白质可重新溶解在原来的溶剂中。因此,这种沉淀作用称为可逆沉淀 作用。属于此类的有盐析作用,低温下丙酮、乙醇使
蛋白质沉淀的
作用,以 ...
蛋白质的沉淀
反应
答:
蛋白质的
沉淀
反应如下:盐析是一种将溶液中
的蛋白质
分离出来的物理方法。它基于蛋白质在高盐浓度条件下与离子相互作用形成沉淀,从而实现蛋白质的分离和提纯。在盐析过程中,通过逐渐加入盐溶液来改变溶液的环境,使得蛋白质与水合的离子产生竞争作用,蛋白质逐渐失去溶解,形成沉淀。物理变化是指物质在
没有
...
为什么
蛋白
不能
沉淀
答:
容易凝聚而产生沉淀。2,pH过酸或者过碱,此时pH环境过于剧烈,不利于蛋白质保持其空间结构,容易发生变性而沉淀。3,加入重金属离子,蛋白可能会重金属离子结合形成难溶性的盐而沉淀。综合来看,你的实验很容易造成
蛋白沉淀
,不过也并不绝对,也许有些结构特殊
的蛋白
尤其是小分子多肽可能不会沉淀。
免疫
共沉淀
答:
一般主要通过添加EDTA抑制金属
蛋白
酶,通过Protease Cocktail(多种蛋白酶抑制剂混合物)可以抑制蛋白酶。 e. 去垢剂对于免疫沉淀实验尤其是免疫
共沉淀
实验是一个非常关键的因素。不同的去垢剂种类和不同的去垢剂浓度主要通过影响以下三个因素来影响免疫沉淀效果: - 细胞
质
/器膜的通透性:因为许多目的蛋白都定位在细胞器...
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