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用一种限制酶切割的弊端
基因工程中用
限制酶切割
质粒和目的基因
用一种限制酶
和两种限制酶是否都...
答:
不可以,只能用同一种限制酶来切割质粒和目的基因。原因是,用同一种限制酶来切割,
可以产生相同的黏性未端
,如果用两种限制酶切割,产生的黏性未端一般不相同。
单
酶切
重组DNA有哪些
弊端
,如何避免
答:
单酶切重组DNA的弊端主要是可能会发生自身环化现象
。避免自身环化的方法:可以选择双酶切。
单
酶切
重组DNA有哪些
弊端
,如何避免
答:
1.可能发生切完之后,连接时自己又重新连上的现象。2.插入片段没有方向性
,比如插入片段的编码链是atcgatg,可以以这个顺序,也可以反过来连接进去。避免方法:1.尝试双酶切,电泳分离切下片段和剩余片段。2.仍用单酶切,可以提高插入片段与载体的浓度比,提高插入片段与载体粘性末端的结合概率。
构建重组载体时用两种
限制酶切割
目的基因的原因
答:
(3)用SalI和HindIII两种限制酶对质粒进行切割时,
会破会四环素抗性基因,但不会破坏氨苄青霉素抗性基因
,因此导入重组质粒的农杆菌能在含有氨苄青霉素的培养基上能生存,但不能在含有四环素培养基上生存,所以培养基A和培养基B分别还含有氨苄青霉素、四环素,含目的基因的是4和6菌落中的细菌.探针是指用...
质粒或目的基因什么时候用同一
种酶
,什么时候用两种?
答:
单酶切:如果用同
一种限制酶切割
质粒和目的基因,会产生四个相同的黏性末端,那么可能会出现四个结果。(1)质粒和质粒连接(2)质粒和目的基因连接(3)目的基因和目的基因连接(4)质粒和目的基因环化。因此为了防止出现上面的情况,会采用双酶切。双酶切就是用两种酶切割目的基因和质粒,这样质粒和...
如果把两种来源不同的DNA用同
一种限制酶
来
切割
,会怎样?
答:
限制酶切割
DNA的原理是识别特定的DNA序列,并在特定的位点进行切割,如果两种来源不同的DNA可以用同
一种限制酶
来切割,说明这两种来源不同的DNA有相同的核苷酸序列,都可以被这种限制酶识别并切割。结果是两种DNA切割后可能会连接在一起。
单
酶切
时间长有
坏处
吗?
答:
如果
酶
没有星活性的话,单切时间长一些没什么问题。但是如果该酶有星活性的话,一定不能
切的
时间过长。
基因工程中
限制
性内切酶能识别和
切割
DNA为什么错了呢
答:
这个末端能与具有互补碱基的目的基因的DNA片段连结,故称为黏性末端。这种
酶
在基因工程中应用最多。另
一种
是在两条链的特定序列的相同部位
切割
,形成一个无黏性末端的平口。
限制
性内切酶能识别特定的核苷酸系列和切割特定的DNA片段,看似是玩弄文字游戏,但特定这两个字不可或缺 ...
为什么用两种
限制酶切
有两种不同的目的基因(产生两种粘性末端)
答:
因为每
种限制
性内切没都有具体的
酶切
位点,酶切位点就是碱基所在的位置,
切的
地方不一样当然目得到的目的基因不一样,至于酶为什么会在选择性剪切这里面的问题就更值得学习了
限制酶
为什么不会
切割
移入的载体质粒?
答:
构建重组质粒时并不是只用同
种限制酶切割
目的基因和载体,虽然理论上本应如此,一般都用同种才会容易处理,但常见的也有将两种限制性内切酶,也就是不同的限制酶进行双酶切,最后也会产生互补的黏性末端。其实用同
一种限制酶
,也就是单酶切,去分别切割目的基因与运载体这种方法是最简单。如果用传统酶...
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