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提取dna时降解的原因
提取dna
样品样品不纯,
降解的原因
有哪些
答:
有蛋白酶污染,处理环境不好,对细胞裂解时间过长等,75乙醇没配好等
DNA
被
降解的
一般
原因是什么
答:
化学因素
强酸强碱,dna变性剂等
DNA降解的
外源因素有哪些
答:
2、过高或过低的PH值都易破坏氢键氧化反应:氧化碱基中的含氮杂环
,使其变性,从而进一步改变一级与二级的DNA构象.酶酶加速DNA的降解(主要是水解)
DNA降解的
可能
原因
视频时间 13:18
质粒
DNA
在不同的溶液中是如何被
降解的
?
答:
葡萄糖能增加溶液的黏度,防止DNA受机械作用而降解。EDTA可螯合Mg2+、Ca2+等金属离子,抑制
DNa
se对
DNA的降解
作用(DNase作用时需要一定的金属离子作辅助因子)。(2)溶液Ⅱ的主要成分为氢氧化钠(NaOH)和SDS。DNA在pH5~9的溶液中是稳定的,但当pH>12或pH<3时,就会引起DNA双链之间氢键的解离而变性。
为什么
提取
植物全基因组
DNA
总是
降解
答:
降解
无怪乎几种
原因
:1,加入
提取
液后,若是65度提取,时间太久,有可能造成部分降解。2,降入氯仿/异戊醇后,剧烈混匀时间太久,造成部分
DNA
断裂 3,打碎组织时最好用液氮处理后研磨的方式,用珠子打碎在后期混匀过程中也容易造成DNA断裂
为什么叶绿素较多的玉米叶片
提取DNA时
,DNA容易
降解
?即使是6片叶左右的...
答:
如果用水溶解,存在一定的概率,水可能为酸性,这样就容易引起
DNA降解
。所以一般用TE溶解比较好,除非用TE会影响影响后续试验。比如Qiagen DNeasy kit的Elution Buffer的是pH9.0的TE。基因组DNA用TE溶解,储存在4度,反复冻融会造成
DNA的
断裂。加入DNA酶也可以防止降解。
为什么
dna
在水溶液中会发生解链
答:
DNA降解的因素:
外界物理因素:温度、湿度
化学因素
:pH值、水解反应、氧化反应 生物因素:酶解及微生物侵染等作用。这些因素都直接与DNA的构型、分子组成有关 DNA分子结构:DNA是由许多脱氧核苷酸残基按一定顺序彼此用3’,5’-磷酸二酯键相连构成的长链。[形成链的作用力——磷酸二脂键,易被水解];大...
提取的DNA
为什么会
降解
答:
我觉得是蛋白杂质太多,建议加一步TRIS苯酚
提取
,再用氯仿异戊醇提取两次,效果肯定会好很多。
抽提的质粒
DNA
电泳时怎么出现切口.断裂或
降解
现象?
答:
(1)使用的是收集后冷冻保藏的细菌。解决方法:使用新鲜培养的细菌。(2)宿主菌富含核酸内切酶。解决方法:增加一步Rinse A洗涤步骤以彻底去除残留的核酸内切酶。或者将质粒DNA进行乙醇沉淀。(3)质粒DNA在Solution II中暴露过久,易造成质粒
DNA的
切口断裂。裂解步骤控制在5分钟内完成。(4)培养的细菌被杂菌...
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