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常用的RNA提取方法
RNA的提取方法
答:
1、酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞
,消化蛋白,然后用酚和酚-氯萃取,高速离心后取上清,所得DNA大小为100-150kb 2、
甲酰胺解聚法
:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。3、
玻璃棒缠绕法
:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩...
RNA提取方法
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答:
1.提取 称取鲜酵母 159或干酵母粉 2.5g,倒入 100ml三角瓶中,加 NaCl 2.5g,水25ml,搅拌均匀,置于沸水浴中提取lh
。2.分离 将上述提取液用自来水冷却后,装入大离心管内,以4000r/min离心10min,使提取液与菌体残渣等分离。3.沉淀RNA 将离心得到的上清液倾于50ml烧杯内,并置入放有冰块的...
RNA的提取方法
步骤及原理.
答:
RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一种总RNA抽提试剂
,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。Trizol作用原理:在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后,裂解液分层成水...
RNA的提取方法
大总结
答:
这篇文章主要讲的是几种常用的RNA提取方法。
1、异硫氰酸胍氯化铯超速离心法
原理:使用蛋白质变性剂异硫氰酸胍有效抑制RNA酶的活性,经过起始密度为1.78g/ml的氯化铯介质,进行密度梯度超速离心,RNA沉淀于管底,而DNA与蛋白质在上清中。使用这种方法,不但能得到高质量的RNA,而且能同时分离出细胞染色体DNA...
RNA提取方法
或技术有哪些
答:
通过使用biog结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱....
如何
提取
得到具有生物学活性
的RNA
答:
提取得到具有生物学活性的RNA的方法:
1、酚抽提法
:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯萃取,高速离心后取上清,所得DNA大小为100-150kb 2、
甲酰胺解聚法
:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。3、
玻璃棒缠绕法
:用盐酸胍裂解...
简述
RNA提取方法
及其注意事项。
答:
可降解标本中
的RNA
,许多组织和细胞中都含有活性很高的RNAase,因此在纯化RNA的过程中要保证无RNAase污染。选择性地使用针对RNAase的蛋白质变性剂、蛋白水解酶和能与蛋白质结合的阴离子去污剂,并联合使用RNAase的特异性抑制剂能极大地防止内源性RNAase对RNA的水解。
提取RNA
的
方法
有硫氰酸胍分离法等。
分离DNA和
RNA
主要
方法
有哪些
答:
经三级过滤后,再利用乙醇沉淀法使其他物质溶于酒精而进一步纯化DNA.⑤二苯胺或甲基绿鉴定法即DNA遇二苯胺(沸水浴)被染成蓝色,遇甲基绿被染成蓝绿色,且颜色的深浅与DNA纯化程度有关.在此过程中设计对照实验,以增强实验中二苯胺对DNA专一性显色结果的可信度.分离DNA和
RNA
主要
方法
有哪些 ...
分离DNA和
RNA
主要
方法
有哪些
答:
经一级过滤后滤出液为DNA核蛋白和
RNA
核蛋白.对于菜花、洋葱等植物材料,在研磨破坏其细胞壁的同时,可考虑适量加入乙二胺四乙酸EDTA以防止DNA酶解.③利用DNA和RNA溶解度的不同析出DNA.在浓氯化钠溶液(2 mol/L)中,DNA核蛋白的溶解度很大,而RNA核蛋白的溶解度很小.在稀氯化钠溶液(0.14mol/L)中...
怎样
提取
细胞核内
的RNA
答:
离心后沉淀加入1 ml裂解液混匀。将处理后的样品在室温放置5分钟,使得核酸蛋白复合物完全分离。向匀浆样品中加0.2ml氯仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置3-5分钟。2-8℃ 12000 rpm离心10分钟。
RNA
主要在上层无色的水相中,把水相转移到新管中,不要吸到沉淀。
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