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大肠杆菌感受态加什么抗性
大肠杆菌感受态
细胞的制备 感受态细胞制备成功关键有
哪些
答:
4.麦康凯培养基(maconkey agar):取52g麦康凯琼脂,加蒸馏水1000ml,微火煮沸至完全溶解,高压灭菌,待冷至60℃左右加入amp储存液使终浓度为50ug/ml,然后摇匀后涂板。5.0.05mol/l cacl2溶液:称取0.28g cacl2(无水,分析纯),溶于50ml重蒸水中,定容至100ml,高压灭菌。6.含15%甘油的0.05mol/l ...
商用
大肠杆菌
DH5a
感受态
细胞,是否含有质粒?或者有没有
抗性
?
答:
DH5a
感受态
细胞是没有卡纳
抗性
的,除非你的染了杂菌或者质粒污染,或者你的卡纳失效了。
同样是培养
大肠杆菌
,为
什么
提质粒用的要在培养基中加入氨苄青霉素AMP...
答:
首先要明白加氨苄等抗生素的目的是筛选
,只有能够表达抗性基因的细菌才能生存。其次,做感受态的目的是为了扩大培养细菌,并不是筛选。最后又加抗生素的目的是看带有相应抗性基因的质粒有没有成功转到细菌中。
大肠杆菌感受态
制备时为
什么
用无
抗性
的培养基?
答:
因为
感受态
细胞本来就不具备
抗性
。后期用载体质粒转化感受态细胞时,我们就是根据 转化成功的
大肠杆菌
(载体质粒进入该感受态细胞)能在含抗生素的培养基上生长 而转化不成功(载体质粒没有进入感受态细胞)的感受态细胞则由于没有抗性而不能生长 这一原理来判断是否转化成功。
商用
大肠杆菌
DH5a
感受态
细胞,是否含有质粒?或者有没有
抗性
答:
含质粒,但没有抗性
,可以直接在无抗性的LB板上划线。
【菌周刊】菌种建库篇|
大肠杆菌
DH5α
感受态
细胞的制备
答:
耀海生物,作为专业的CDMO服务商,以DH5α
感受态
细胞为核心,致力于生物医药领域的发展。我们提供包括重组蛋白、质粒在内的全方位CRO/CDMO/MAH服务,始终坚持创新和优质服务,助力制药公司加速新药研发,推动中国生物医药产业迈向新高度。回顾历史,自1970年噬菌体DNA转染
大肠杆菌
的研究开始,再到1990年的高效...
感受态
细胞
大肠杆菌
的培养所用的培养基,含
什么
成分
答:
ml轻轻悬浮细胞,充分混匀,冰上放置30 min后,4℃下4000rpm离心10min;(5)弃去上清,并倒置1 min,以便最后的痕量培养液流尽;(6)加入4 ml预冷含15%甘油的0.1 mol/L的CaCl2溶液,轻轻悬浮细胞,冰上放置几分钟,即成
感受态
细胞悬液;(7)感受态细胞100 μL分装,贮存于-70 ℃保存备用。
做
大肠杆菌感受态
转化,培养后不管阴性阳性都长菌的原因除了抗生素失效...
答:
如果是药敏试验,很可能是耐药或药的浓度不够,您的题问有点不太懂,我的回答请参考。
质粒DNA转化
大肠杆菌感受态
细胞再热激以后进行活化培养,这时培养基为 ...
答:
因为这时候抗抗生素的基因还没有表达出产物,加入抗生素会把细胞杀死。不过青霉素是个例外,因为青霉素只是阻止细菌细胞壁的合成,而不是直接杀死细胞,所以它只是抑制增殖,细胞还可以存活,然后表达抗青霉素基因,然后就能进行正常的增殖了。
为实现目的基因与载体结合,以便在
大肠杆菌
中大量表达相应的蛋白质,研究...
答:
(1)构建基因表达载体时,需要用限制酶BamH I切割含有目的基因的外源DNA分子和质粒,再用DNA连接酶将目镜基因和质粒连接形成重组质粒,再与
大肠杆菌感受态
细胞混合.因为重组质粒含有氨苄青霉素
抗性
基因,所以最后将混合物接种在含有氨苄青霉素平板培养基上培养,以筛选含有重组质粒的大肠杆菌.(2)①第1组...
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